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El objeto del trabajo es atacar materiales de zinc con cloro gaseoso, separando este metal de los demás, variando las condiciones de temperatura, tiempo, corriente gaseosa y concentración del material atacado. Este método no es mencionado en las grandes enciclopedias de quimica industrial o inorgánica, y en todo el Chemical Abstracts hay pocas referencias al respecto, a pesar que puede tener importancia metalúrgica. Según Liddell: Handbook of Non-ferrous Metallurgy (N.Y. McGraw Hills, 1945) en método puede llegar a tener mucha aplicación, si el cloro se consigue a bajo precio y en cantidades grandes. Los ensayos se hicieron con óxido de zinc puro, blendas cruda y tostada y barro Moore. La blenda proviene de la mina argentina más importante, Sierra de Aguilar, yacimiento cuya ley media es de 11% de plomo, 16% de zinc y 280 g/t de plata, y producción anual promedio de los últimos diez años de 40 mil toneladas de concentrado de zinc (± 50% de contenido de zinc.). El barro Moore es el residuo que sale del filtro del mismo nombre después del tratamiento ácido que sufre la blenda tostada en la fabricación del zinc electrolítico. La blenda cruda contiene 49,1% de zinc, 7,8% de hierro, 3,6% de manganeso; la tostada 54,8%, 8,7% y 3,1% de los mismos elementos; el barro Moore 28,7%, 16,0% y 4,2%. La finalidad es obtener la mayor cantidad posible de zinc y la menor posible de hierro y manganeso al estado soluble. Se hicieron cloraciones variando la temperatura de 400 a 800°C y el tiempo de 5 a 30 minutos. La corriente de cloro no necesitó ser modificada, ya que se produjo buena extracción con cantidades apenas superiores a las estequiométricas. Para blenda tostada las temperaturas y tiempos óptimos son respectivamente de 600-700°C y 10-15'. Aunque a temperaturas y tiempos mayores la extracción del zinc puede mejorar algo, la del hierro y manganeso lo hace mucho más apreciablemente; por esta razón no conviene aumentar estos variables. La selectividad es buena, pudiendo extraerse más del 90% del zinc original, y al mismo tiempo menos del 10% del hierro y manganeso. En la blenda cuuda esta selectividad es mucho menos buena, ya que aún a temperaturas menores se extrae bastante hierro y manganeso, teniendo la selectividad óptima a la temperatura más baja ensayada, 400°C. En este caso conviene usar alta temperatura o tiempo de ataque más largo, y efectuar de esta manera la cloración completa de todos los metales contenidos en la blenda. Con el barro Moore solo se hicieron ensayos aislados, pero igual se pudo comprobar que existe una buena separación de zinc y hierro, a pesar de la cantidad relativa bastante alta de este último elemento con respecto al primero.

Fil:Soria, Ivana. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

Con el trabajo de A. Wohl en 1893 sobre degradación de los nitrilos acetilados de los monosacáridos, aparecen por primera vez en el campo de los Hidratos de Carbono las aldosas diamidas. A este derivado de la Larabinosa se lo denominó L-arabinosa diacetamida, aunque de acuerdo a una nomenclatura más ortodoxa debería ser la N,N'-diacetil-L-arabinosilidendiamina. Trabajos posteriores mostraron que estos compuestos podían obtenerse no solo por degradación de los nitrilos acilados de los monosacáridos, sino también por amonólisis de aldosas parcial o totalmente aciladas. Asimismo se suministraron pruebas experimentales concluyentes de que la formación de estas aldosas diamidas tenía lugar por intermedio de un mecanismo intramolecular, de acuerdo a lo sugerido por Isbell y Frush y en contraposición con la suposición de Wohl de que se producían por condensación de la forma aldehídica libre con las amidas formadas durante la amonólisis. En esta Tesis se ha realizado la amonólisis de varios derivados parcialmente benzoilados de la D-glucosa, y se han comparado los rendimientos en D-glucosa dibenzamida obtenidos con los ya reseñados en la literatura para otros derivados de la D-glucosa y otras hexosas. Se ha destacado asimismo la influencia que, sobre el rendimiento en estas diamidas, tienen las velocidades conque se realizan los diversos pasos preparatorios para la migración de los grupos acilos hacia el carbono 1, a saber: amonólisis del grupo acilo sobre el carbono 1, apertura del ciclo hemiacetálico y condensación con el amoníaco. Se ha señalado también la competencia entre estas reacciones y las simultáneas que se oponen a la migración citada, como ser: amonólisis de los grupos acilos, migración hacia otros carbonos distintos del 1 y formación de ciclos hemiacetálicos estables. Del análisis realizado puede concluirse que el rendimiento en aldosas diamidas por amonólisis de derivados parcial o totalmente acilados de los monosacáridos, es el resultado de un complejo balance entre una serie de reacciones simultáneas y competitivas. En una segunda parte hemos preparado los nitrilos benzoilados L-arabónico y D-xilónico a fin de someterlos a una degradación en medio alcohólico amoniacal. Es interesante hacer notar las dificultades con que nos hemos encontrado para la cristalización de estos compuestos. En el caso del tetrabenzoil-L-arabono nitrilo hemos podido llegar a un producto que si bien el análisis elemental cuantitativo y la determinación de grupo nitrilo han mostrado como puro, precipita amorfo por enfriamiento de sus soluciones en los solventes comunes. El tetrabenzoil-D-xilono nitrilo solo pudo obtenerse puro en un 90% luego de un pasaje por alúmina activada, ya que por enfriamiento de sus soluciones en los solventes comunes precipita como una goma que no cristaliza por estacionamiento. Las purificaciones posteriores por cromatografía o sublimación a alto vacío, no permitieron obtener un producto cristalizable. En ambos casos la degradación en medio de metanol-amoníaco condujo a la obtención de compuestos bien cristalizables, cuyo análisis y el de sus respectivos derivados acetilados, demostró que se trataba de la L-eritrosa dibenzamida y la D-treosa dibenzamida respectivamente. Asimismo, y a fin de completar el cuadro de los derivados benzoilados de las pentosas, se llevó a cabo la amonólisis de la tetrabenzoil-β-D-ribopiranosa, obteniéndose la D-ribosa dibenzamida. Por último, en una tercera parte, hemos aplicado al pentabenzoil-D-glucono nitrilo y al tetrabenzoil-L-ramnono nitrilo el procedimiento de hidrólisis con ácido bromhídrico en medio acético glacial, obteniendo sin mayores inconvenientes la pentabenzoil-D-glucono amida y la tetrabenzoil-l-ramnono amida. Como confirmación hemos deshidratado estas amidas con oxicloruro de fósforo obteniendo nuevamente los nitrilos correspondientes.

En este trabajo nos propusimos estudiar la acción del ClCN y ICN sobre el etileno y el acetileno y determinar los posibles productos de adición o condensación formados.

Fil:Berra, Olinda Clara. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

La benzofenonas sustituidas son intermediarios en la síntesis de varias drogas, y presentan propiedades que las convierten en compuestos de interés medicinal e industrial, por lo que han sido y continúan siendo ampliamente estudiadas. El interés que reviste esta familia de compuestos fue un factor importante que condujo a la realización de numerosos estudios referidos a su síntesis. Al observarse la factibilidad de llevar a cabo la síntesis por acilación directa en el caso general de ácidos orto-sustituidos (43) surgió la inquietud de investigar más a fondo los aspectos íntimos de esta reacción, lo que constituye el objetivo de este trabajo.

Tesis (Doctor en Ciencias Agropecuarias)--UNC- Facultad de Ciencias Agropecuarias, 2016.

Una alternativa para resolver los problemas que enfrenta la terapia antiviral actual, como laaparición de infecciones emergentes y mutantes resistentes a las drogas de uso clínico, es encontrar compuestos que interfieran con factores celulares esenciales para la propagación viral, pero prescindibles para la viabilidad celular. De este modo, también se obtendrían antivirales con mayor espectro de acción. Por otro lado, muchos virus provocan inmunopatologías, siendo necesaria la administración de glucocorticoides junto con el antiviral, aunque esto está contraindicado para las infecciones herpéticas porque produce la reactivación del virus. Por esta razón, resultaría de gran utilidad descubrir antivirales que posean además propiedades inmunomoduladoras. En este sentido, los esteroides representan una opción diferente a las estructuras químicas de los antivirales tradicionales, que son normalmente análogos de nucleosidos. Los objetivos de esta tesis fueron sintetizar nuevos compuestos esteroidales polifuncionalizados, estudiar sus propiedades antivirales contra diferentes virus y evaluar la actividad inmunomoduladora de aquellos más efectivos. Los estudios biológicos efectuados sobre dos series de esteroides, que fueron sintetizadas mediante la reacción multicomponente de Ugi, permitieron identificar un compuesto con actividad contra herpes virus simplex tipo 1, y otro de acción más amplia, activo contra los virus de la estomatitis vesicular, herpes y adeno. Ambos alteraron el transporte intracelular y el patrón de glicosilación de glicoproteínas virales. Asimismo, ambos esteroides modularon la producción de citoquinas sin provocar la activación del receptor de glucocorticoides ni del factor de transcripción NF-kappaB. En conclusión, las bioactividades descriptas convierten a los dos esteroides sintéticos en buenos candidatos para tratar aquellas inmunopatologias virales sin terapia disponible, o como alternativa para inhibir las cepas resistentes a aciclovir.

El Gammaherpesvirus bovino 4 (BoHV-4) es un miembro del género Rhadinovirus, de la subfamilia Gammaherpesvirinae, dentro de la familia Herpesviridae. Al igual que los demás agentes virales de esta subfamilia, se caracteriza por su capacidad linfotrópica, pudiendo establecer latencia en linfocitos y monocitos, además de infecciones citolíticas en células epiteliales y o fibroblásticas. El BoHV-4 posee genes homólogos a los celulares, como el gen de la 2β-1,6-N-acetilglucosaminiltransferasa, con un 81.1% de similitud con la enzima producida por células de humano. Esta enzima tiene un rol crucial en la síntesis de glucanos. Asimismo, codifica una proteína esencial para el establecimiento de latencia, las proteínas v-Bcl2 y v-Flip (productos asociados a procesos de muerte celular), y la glucoproteína gp180 que tiene un rol importante en la provisión de un escudo de O-glucanos que enmascararía los epitopes en las glucoproteínas virales, contribuyendo a la evasión de los anticuerpos neutralizantes. En contraste con la mayoría de los gammaherpesvirus, el BoHV-4 presenta la capacidad de replicar en un amplio rango de especies domésticas y silvestres, así como en una gran variedad de cultivos celulares, incluyendo líneas celulares de humanos. Además, puede producir distintos tipos de síndromes, y si bien se lo asocia con enfermedad uterina posparto en bovinos, aún no se ha podido esclarecer el rol que desempeña en esta patología. El primer aislamiento del BoHV-4 fue realizado por Bartha en Hungría, en 1963; posteriormente fue aislado en Estados Unidos. Desde entonces, más de 40 cepas diferentes han sido aisladas en todo el mundo. A partir de estas cepas se establecieron tres grandes grupos basados en su análisis genómico: el tipo Movar 33/63, que comprende las cepas europeas; el tipo DN599, conformado por las cepas americanas, y un tercer grupo que incluye cepas de búfalo africano. La capacidad del BoHV-4 de presentar variaciones genómicas ha sido demostrada en estudios genéticos de cepas de referencia. Esta variabilidad sería el resultado de eventos de recombinación entre cepas y dentro de una misma cepa. En Argentina, el BoHV-4 fue aislado y caracterizado molecularmente por Verna et al. en el año 2007 a partir de muestras de vacas abortadas. El estudio de filogenia de las cepas locales aisladas demostró un importante grado de variabilidad genómica entre las cepas circulantes, revelando la existencia de tres grupos diferentes, designados como genotipos 1, 2 y 3. Las cepas de los genotipos 1 y 2 presentaron mayor similitud con los tipos europeo y americano, respectivamente; las del genotipo 3 constituyen un nuevo grupo filogenético. Actualmente hay más de 50 aislamientos de BoHV-4 en nuestro país; el 85 % de estos se obtuvieron de muestras de mucus cérvico-vaginal de vacas que presentaron abortos. Sobre la base de la información que aporta la bibliografía internacional y los antecedentes locales se puede inferir que existen amplias diferencias en las propiedades biológicas y en el potencial patogénico del BoHV-4. Las variadas manifestaciones clínicas asociadas a las infecciones por el BoHV-4 y la heterogeneidad en los patrones de restricción del genoma viral, sugieren que las variantes genómicas podrían asociarse a variaciones en la actividad biológica de este virus. Por lo mencionado precedentemente, considerando la importancia de la presencia del BoHV-4 en Argentina en función a su relación con pérdidas reproductivas y potencialidad de este virus para infectar células humanas, el objetivo de este trabajo de tesis fue realizar un estudio de cepas virales filogenéticamente diferentes, aisladas en nuestro país, a los efectos de conocer si la diferencias genéticas están asociadas a características biológicas particulares. Para cumplir con los objetivos propuestos se desarrollaron experimentos in vitro para estudiar la actividad biológica de seis cepas argentinas pertenecientes a los tres grupos genéticos mencionados, sobre líneas celulares de diferente origen. Se analizaron la cinética de replicación viral, la manifestación de efecto citopático, la capacidad lítica, la producción de placas de infección y la capacidad de infección de células de origen humano. Luego se estudiaron los efectos de las diferentes cepas sobre su capacidad de inducir apoptosis, para lo cual se procedió a identificar cambios nucleares compatibles con esta, detectar la fragmentación del ADN y detección y análisis de los genes v-Flip y v-Bcl2. Para complementar estos estudios se realizó un experimento in vivo, mediante la infección experimental de bovinos, con el objetivo de realizar un estudio descriptivo de la distribución tisular de las cepas locales del BoHV-4 genéticamente diferentes. El estudio de cinética de replicación se realizó con las seis cepas de BoHV-4 pertenecientes a los tres grupos genéticos en las líneas celulares de origen humano (HeLa y Hep2), la línea de origen bovino MDBK y la línea Vero de riñón de mono. La cepa (08/330), correspondiente al genotipo 2, alcanzó títulos de 5 a 9 logaritmos, significativamente más altos (p < 0.05) que el resto de las cepas. La cinética de replicación de las cinco cepas restante presentó mayor variabilidad en los cultivos de HeLa y Hep2 en comparación con las líneas celulares MDBK y Vero, con títulos que variaron de 2 a 4.5 logaritmos. La cepa 12/365 (genotipo 2), no manifestó actividad viral en la fracción extracelular a las 24 horas posinfección (hpi) en ninguno de los cultivos celulares, además esta cepa mostró mayor variabilidad en la cinética en las cuatro líneas celulares. Este ensayo permitió, además, comprobar que las líneas de origen humano y de mono son susceptibles y permisivas a la infección por estas cepas locales de BoHV-4. En los distintos ensayos, para confirmar la presencia del genoma viral se modificó y optimizó una nested PCR, descripta por Fábián y Egyed (2004), para amplificar un fragmento de 271 pares de bases (pb) del ORF25, el cual codifica la proteína mayor de la cápside. La mayoría de las cepas produjo efecto citopático entre las 24 y 48 hpi en células MDBK y Hep2. En las líneas celulares HeLa y Vero, la producción de efecto se evidenció más tardíamente (72 hpi). La presentación del efecto citopático fue variable entre las cepas y entre los cultivos celulares. En el ensayo de placa de lisis, se observó una amplia variabilidad en los tamaños de las placas, principalmente entre las líneas celulares. Las cepas 09/227, 08/263 y 07/435 produjeron placas de tamaño medio (1 a 3 mm) en células MDBK, el tamaño de estas placas fue significativamente mayor (p < 0.05) con respecto a las placas producidas por las cepas 08/330 y 12/365. Por el contrario, en las células HeLa, estas cepas produjeron placas significativamente mayores (p < 0.05) que las cuatro cepas restantes. En las células Hep2 y Vero, todas las cepas produjeron placas mínimas (< 1mm). No se produjeron placas grandes (> 3mm) en ninguno de los tipos de células. Como resultado de la inmunofluorescencia directa utilizada en el ensayo de placas de infección, se observó una marcada disparidad entre las distintas cepas para ser reconocidas por los anticuerpos disponibles. Posiblemente, el uso de reactivos elaborados con anticuerpos dirigidos contra determinantes antigénicos de cepas foráneas no resultan de utilidad para la identificación efectiva de aislamientos locales. En el estudio de los efectos de las cepas de BoHV-4 sobre la inducción de apoptosis se identificaron cambios nucleares indicativos de apoptosis mediante tinción con DAPI. El mayor número de células con cambios nucleares, representado como índice relativo de apoptosis (IRA) y la mayor variabilidad entre cepas se registraron en la línea celular MDBK. En los cultivos de células Hep2 y HeLa no se evidenciaron variaciones significativas (p > 0.05) entre las cepas, al igual que en la línea Vero, en la cual se registró el IRA más bajo. Para evaluar si las cepas de BoHV-4 analizadas inducen la fragmentación del ADN se utilizaron las técnicas de electroforesis en gel de agarosa y TUNEL sobre las líneas celulares MDBK y HeLa. Solamente en las células HeLa se observó fragmentación del ADN, a las 24 hpi, en las células inoculadas con las cepas 09/508 y 08/330. Utilizando la técnica de TUNEL, los IRAs más elevados se registraron, en las células MDBK a las 24 hpi, aunque sin detectarse diferencias entre el control positivo y las seis cepas de BoHV-4 (p > 0.05). A las 48 hpi solamente las cepas 08/263 y 09/227 mostraron IRAs significativamente más elevados (p < 0.05) que ambos controles. En las células HeLa, sólo la cepa 12/365 evidenció un IRA significativamente mayor (p < 0.05) que los controles a las 48 hpi. También se analizaron los genes v-Flip y v-Bcl2 en los seis aislamientos. En las cepas 08/263 y 08/330, correspondientes al genotipo 2, no fue posible amplificar la secuencia de ninguno de estos genes. Las variaciones halladas en las cuatro cepas restantes, ocasionadas por sustituciones nucleotídicas en ambos genes, se tradujeron en cambios en las respectivas proteínas y en mayor grado en la proteína v-Flip, por lo que se podría inferir que la actividad de esta proteína presentaría variaciones dependiendo de la cepa. Si bien sólo se utilizaron cuatro cultivos celulares de distinto origen, la evaluación general de los resultados revela que las cepas de BoHV-4 analizadas no inducen elevados niveles de apoptosis. Por último, se realizó un estudio in vivo en un modelo bovino para analizar la distribución tisular, presencia, tipo y severidad de lesiones y respuesta inmune humoral. Se seleccionaron tres cepas de BoHV-4 de diferente genotipo. Se utilizaron 4 terneros de 6 meses de edad, inoculados por vía intranasal mediante aerosolización, de la siguiente manera: ternero 1 (T1) cepa 09/508 (genotipo 1), ternero 2 (T2) cepa 08/330 (genotipo 2), ternero 3 (T3) cepa 07/435 (genotipo 3) y ternero 4 (T4) control inoculado con medio de cultivo como placebo. Se extrajeron muestras de secreciones nasales, oculares y sangre con y sin anticoagulante a los 0, 7, 14 y 21 días posinfección (dpi) para la detección de genoma viral, aislamiento viral y para la búsqueda y determinación de los títulos de anticuerpos neutralizantes. La eutanasia de los animales se realizó a los 21 dpi y se extrajeron muestras de diferentes tejidos para aislamiento viral, detección de genoma viral e histopatología. No se observaron signos clínicos en ninguno de los animales. El ADN viral se detectó en leucocitos de sangre periférica (LSP) del T1 a los 21 dpi y del T2 a los 14 y 21 dpi. En las muestras de tejidos, se detectó el genoma viral en bazo, médula, ganglio trigeminal, tráquea y lóbulo piriforme del T1 (cepa 09/508); bazo, tráquea, riñón, linfonódulo retrofaríngeo y lóbulo frontal del T2 (cepa 08/330), y linfonódulo pulmonar, lóbulos frontal y piriforme del T3 (cepa 07/435). Las muestras de secreciones, tejidos y LSP del ternero control (T4) resultaron negativas. La cepa 08/330 se aisló en las secreciones oculares y nasales del T2 a los 7 dpi y la cepa 07/435 de secreciones nasales del T3. A los 14 dpi se aislaron las cepas 09/508 (genotipo 1), 08/330 (genotipo 2) y 07/435 (genotipo 3) en las secreciones nasales de T1, T2 y T3, respectivamente. Todos los aislamientos se identificaron por nested PCR. Ninguna de las cepas se aisló de los tejidos y LSP de los tres animales inoculados, y las muestras del ternero control también resultaron negativas. Durante la necropsia no se observaron lesiones macroscópicas en ninguno de los animales. Microscópicamente se observó una leve respuesta inflamatoria con infiltrado mononuclear en tejidos respiratorios y linfáticos del T1 (cepa 09/508) y T3 (cepa 07/435). En el tejido nervioso de estos animales se observó gliosis leve, neuronas colapsadas con núcleos picnóticos, citoplasma eosinofílico y cromatolisis, hipercromatosis neuronal y satelitosis leve. No se hallaron lesiones histológicas en las muestras de T2 (cepa 08/330) y T4 (control). En los sueros de los cuatro animales se observó actividad neutralizante para la cepa 08/330, al igual que para la cepa 07/435 en los T1, T2 y T3. Solamente se detectó seroconversión en T1, a los 21 dpi, cuando los sueros se enfrentaron con la cepa homóloga (09/508). Cuando se analizaron los sueros con las tres cepas no utilizadas en el ensayo in vivo (08/263, 12/365 [genotipo 2] y 09/227 [genotipo 3]) sólo se evidenció efecto neutralizante para la cepa 08/263 en T1, T3 y T4, en bajos títulos. Los hallazgos de este estudio sugieren que, aunque leves, hay diferencias en la actividad biológica de las cepas utilizadas en este trabajo, además de comprobarse que estos aislamientos locales de BoHV-4 pueden infectar células de origen humano. No obstante, a pesar de las diferencias observadas en la actividad de estas cepas de BoHV-4 in vitro, no fue posible establecer una asociación entre los grupos filogenéticos y los patrones de comportamiento biológico de cada cepa en los experimentos in vitro y en el modelo experimental in vivo.

Fil:Sivak, Mirta Noemí. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.