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El objetivo de este Trabajo de Tesis fuá desarrollar un Sistema Termogravimétrico, adecuado para el estudio de reacciones de cloración, y aplicarlo al estudio de la cinética de la reacción de CI2 con C y ZrO2; reacción que conduce a la formación de ZrCI4; producto de interés en la industria nuclear. El diseño, construcción y calibración del Sistema Termogravimétrico, construido sobre la base de una electrobalanza Cahn 2000, fue una parte muy importante de la Tesis. En la construcción del Sistema Termogravimétrico se realizó: el diseño; el montaje propiamente dicho; la calibración, con vistas a aplicarlo al estudio cinético de la reacción a estudiar y el acoplamiento con un sistema de adquisición de datos. En este aspecto, las calibraciones y su aplicación a estudios de cinética química significaron una contribución original a las técnicas termogravimétricas. La cloración de óxidos metálicos en presencia de carbono se conoce con el nombre de reacciones de carbocloración y se aplica fundamentalemnte a la obtención industrial de los cloruros de titanio y circonio. Una característica del sistema de reacción propuesto para este estudio, es la escasa información bibliográfica sobre el mismo, o sobre sistemas similares. Esta escasa información previa hizo necesario la realización del estudio de los sistemas de interacción parciales : CI2-C y CI2-ZrO2. La interacción CI2-C se estudió por termogravimetría. Se realizó también mediciones complementarias por espectrometría de masa de haz modulado. Por otra parte, el sistema Cl2-ZrO2 fue estudiado, fundamentalmente, por difracción de rayos X y por microscopía electrónica de transmisión. Una vez realizados los estudios mencionados se estuvo en condiciones de iniciar el estudio de la reacción de carbocloración, que involucra a ambas interacciones parciales, además de la reacción quimica misma. Los resultados obtenidos en estos estudios permitieron proponer un mecanismo para la metaestabilidad de la fase tetragonal de la circonia y un mecanismo para la interacción CI2-C; pusieron en evidencia que la carbocloración de circonia ocurre por dos mecanismos de reacción diferentes y permitieron proponer un mecanismo de reacción para cada una de las etapas de reacción.

Fil:Vago, Ernesto Rómulo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

El estudio de la reacción entre el anión dicromato y el catión mercurioso que constituye el objeto principal de este trabajo, ha sido muy poco considerado en la bibliografía química. Solamente se consignan en ella, a principios de siglo, algunos estudios de compuestos obtenidos de los ácidos crómico y dicrómico con diversos metales pesados. En esencia; hemos querido estudiar la acción del anión dicromato sobre el catión mercurioso a distintos pH, obtenidos a su vez con distintos ácidos.

Fil:Tuja, Juan Carlos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

Schlesinger y colab. mencionaron al estudiar las propiedades de tetracloruro de diboro, que su reacción con diborano era muy compleja y determinaron la formación de hidrógeno, tricloruro de boro, un líquido viscoso y una fase gaseosa inestable. Los halogenuros de los hidruros de boro están aún poco caracterizados; de ahi el interés que ofreció, dado el sistema involucrado, la fase inestable mencionada por los autores citados. Tetracloruro de diboro se descompone espontáneamente a temperatura ambiente, dando tricloruro de boro y sólido de composición (ClnB)x. A O°C ese proceso es poco apreciable, por lo que se eligió esa temperatura para estudiar la reacción, sin mayores interferencias debidas a tricloruro de boro. En esas condiciones y con cantidades equimolares de reactivos se obtuvo un sistema final formado por un sólido no estudiado y una fase gaseosa, en la que se determinó por condensación fraccionada y espectrometría infrarroja, la presencia de tricloruro de boro, dicloroborano y un compuesto cuya naturaleza no se podía establecer, aunque se tenía indicios sobre la misma. Requirió un gran esfuerzo experimental obtener una masa tal de este compuesto, que permitiera realizar algunas determinaciones, dada su inestabilidad al separarlo del sistema en que se formaba. Se obtuvo finalmente, por condensación fraccionada, 20 mg. del mismo, con lo que se determinó su peso molecular, espectro infrarrojo y presiones de vapor entre -110°C y - 80°C. En base a la primera de estas determinaciones y comparación de su espectro IR con los de los monoalquildiboranos, se lo reconoció como monoclorodiborano. Teniendo en cuenta la descomposición espontánea de Cl4B2 dando Cl3B, se estudió simultáneamente la reacción entre tricloruro de boro y diborano. Schlesinger y Burg y posteriormente Stock, habian estudiado este sistema, encontrando como único producto a monoclorodiborano. Brown y Tierney en 1959 no encontraron a temperatura ambiente, ningún cambio significativo en el sistema al cabo de 24 horas. En el presente trabajo se llegaron a las siguientes conclusiones: A O°C no hay indicios de reacción, de tal forma que se puede descartar su influencia sobre la reacción entre tetracloruro de diboro y diborano, a esa temperatura. A temperatura ambiente, el principal producto de la reacción es dicloroborano, mientras la formación de monoclorodiborano depende marcadamente de la concentración de diborano. El hecho de que ambas reacciones dieran como resultado fases gaseosas semejantes, indujo a estudiarlas comparativamente. En experiencias exploratorias se habían obtenido indicios de formación de intermediarios, por lo que se decidió estudiar las dos reacciones en celda para gases, siguiendo el curso de las mismas por espectrofotometría infrarroja. Se realizaron experiencias con distintas concentraciones relativas de reactivos. Se determinó en ambas reacciones, la formación de compuestos que preceden a monoclorodiborano y que desaparecen del sistema o se conservan en muy baja concentración, al transcurrir la reaccion. No se pudo aislarlos, pero se los obtuvo en fracciones de volatilidad conocida. En base al estudio comparativo de los espectros infrarrojos en que aparecen, con los espectros conocidos de derivados semejantes y teniendo en cuenta las posibilidades que permitía el sistema, se consideró a los intermediarios como monocloroborano y diclorodiborano. Hacerlo asi, permite explicar coherentemente el curso de las dos reacciones y entender la influencia de la concentración de los reactivos, sobre la composicióndel sistema final. Efectivamente, aparecen con la formación de esos intermediarios dos equilibrios que regulan esa composición: monocloroborano, monoclorodiborano y dicloroborano, diclorodiborano. En base a los datos obtenidos y teniendo en cuenta la diferente velocidad de las dos reacciones, se sugiere un mecanismo común a ambas, apoyado en la formación del radical Cl2B.

El estudio de la reacción térmica entre la tetrafluorhidracina, N2F4, y otros compuestos fluorados presenta interés, a pesar de la dificultad de su preparación, por tratarse de una sustancia que se disocia en radicales libres difluoramina, NF2. Este radical puede abstraer átomos de flúor de compuestos en los que la energía de unión es relativamente baja y forma así trifluoruro de nitrógeno, NF3, compuesto muy estable, en el que la energía de unión NF2-F es 57,1 Kcal/mol (nos referimos aquí a la primera disociación). Es de destacar el interés que tiene su reacción con el monóxido de flúor, F2O, ya que se han realizado en este instituto estudios de reacciones de compuestos nitrogenados con esta sustancia. La reacción entre el monóxido de flúor y el dióxido de nitrógeno en equilibrio con tetróxido de dinitrógeno fué estudiada por Staricco, Siere y Schumacher. De tal modo el antecedente fundamental para nuestro estudio era la reacción entre el dióxido de nitrógeno, el radical libre, OF, restante reacciona con el dióxido de nitrógeno dando fluoruro de nitoxilo, NO3F, (excitado) que en parte se estabiliza y en parte se descompone. En nuestro caso era de esperar algo similar; que se formara trifluoruro de nitrógeno por abstracción, reacción energéticamente justificable, ya que la energía de unión FO-F es de 41 Kcal/mol. El radical libre, OF, formaría entonces un compuesto intermedio o estable de fórmula NF2OF. Esta fué nuestra hipótesis de trabajo y es lo que luego hemos postulado en el supuesto mecanismo de la reacción. b) Parte experimental. El estudio de la reacción requería poner en contacto ambos reactivos en proporciones y temperaturas desconocidas y que debían ser investigadas con cierto cuidado; se utilizó un recipiente cilíndrico de aluminio de 450 cm^3. El reactor se conectaba a un manómetro Bodenstein que actuaba como instrumento de cero, y la presión se medía mediante un manómetro externo de mercurio, de rama cerrada, o mediante un manómetro de sulfúrico para pequeñas variaciones de presión. El resto del sistema era el usual para este tipo de trabajos. Se termostatizó asegurando fluctuaciones menores que 0,05°C entre 110° y 170°C. Preparación de reactivos. Monóxido de flúor: fué preparado de acuerdo a la reacción propuesta por Lebeau y Damiens, que consiste en hacer pasar flúor por una solución de hidróxido de sodio al 2%. Tetraflúorhidracinas: La mayoría de los métodos consiste en poner en contacto trifluoro de nitrógeno con algún elemento fuertemente aceptor de flúor, los más usados son: cobre, mercurio, carbono, arsénico, antimonio. También se produce tetraflúorhidracina cuando se realiza la fluoración del amoníaco con exceso de amoníaco. El método definitivamente usado por nosotros es el descripto por Draedner, Tlumac o Young, que consiste en hacer pasar trifluoruro de nitrógeno a través de un reactor de hierro forjado conteniendo mercurio a la temperatura de 320°-330°C. Trifluoruro de nitrógeno: fué preparado por el método descripto por Simons, que consiste en la electrólisis de piridina en ácido fluorhídrico anhidro. Análisis de resultados. Se estudio la reacción entre 110° y 170°C, y se determino la estequimetría de la reacción comparando la variación total de la presión con las presiones iniciales de diflúoramina y tetraflúorhidracinas demostrándose que los resultados experimentales coincidían con una estequiometría del tipo: *Ver en tesis* de modo que la relación entre la variación de la presión total y la variación de la presión del reactivo en defecto viene dada por: *Ver en tesis* Esta relación fué determinada experimentalmente, sobre la base de la determinación de la variación total de la presión hasta la terminación de la reacción, el conocimiento de la presión inicial de la mezcla de NF2 y N2F4 y el conocimiento de la constante de equilibrio entre éstos últimos reactivos a la temperatura de la reacción. Posteriormente se determinó por espectrofotometría en el infrarrojo el NF3 y el FNO como único producto de la reacción. c) Cinetica: En base a la relación que vincula la variación de la presión con la variación de la presión de los reactivos: *Ver en tesis* y reemplazando esta expresión en función de las presiones de diflúoramina sobre la base de la constante de equilibrio: *ver en tesis* y despejando, se obtiene la expresión que da la presión de diflúoramina en función de la variación de presión de la presión inicial de diflúoramina y de la constante de equilibrio: *Ver en tesis* Conociendo la variación de la presión y la de la diflúoramina se puede conocer las variaciones de la presión de N2F4 y de F2O y, por lo tanto, las presiones instantáneas de los reactivos y productos. *Ver en tesis* Es necesario aclarar que todas estas expresiones tienen sentido en la medida que la velocidad de las reacciones directa o inversa del equilibrio son mucho más rápidas que la reacción global. Con los datos anteriormente indicados pueden determinarse la velocidad de reacción definida como -ΔP(F2O)/Δt; las presiones medias de los reactivos en cada uno de los intervalos y con estos datos las constantes de velocidad respecto de las dos reacciones posibles: *Ver en tesis* Determinadas ambas constantes de velocidad de reacción así definida se observó que k se mantenía constante mientras que k´ crecía monótonamente a medida que progresaba la reacción. En cada experiencia se obtuvieron constantes de velocidad para cada intervalo, de ellas se obtuvo el promedio para cada experiencia. A 130°C y 140°C se hicieron varias experiencias de modo que se obtuvo el promedio pesado de las constantes de cada uno de los ensayos. Los resultados finales son los siguientes: *Ver en tesis* Con estos datos se calculó la energía de activación; tomando valores succesivos de las constantes, se calcularon también los errores de las energías de activación obtenidos: Ea= 22,6 +- 0,3 kcal. El factor pre-exponencial fué: A= (1,35*10^14 cm^3mol^-1seg^-1. La energía de activación para la teoría de colisiones: Kc=22,2 Kcal. de modo que A´ para esta teoría es: A´= 3,38*10^12 De tal manera la expresión general de la constante de velocidad de reacción según la teoría de colisiones es: *Ver en tesis* Del factor pre-exponencial obtenido y tomando un diámetro de colisión para el monóxido de flúor y la diflúoramina de 4,5 Å, el factor estérico resulta: *Ver en tesis* Discución. El resultado obtenido determina que efectivamente la velocidad de la reacción global es mucho más lenta que la que correspondería a la descomposición de la tetraflúorhidracina (tomando como energía de la unión (N---N)) 21,7 Kcal/mol.). De modo que lo determinado corresponde a la reacción: *Ver en tesis* hemos por otro lado supuesto un mecanismo más probable para el resto de las reacciones: *Ver en tesis*

La reacción álcali-carbonato (RAC) es una reacción química inusual que afecta la durabilidad del hormigón y constituye un tema de gran controversia entre investigadores y tecnólogos del hormigón. Desde 1991, el autor ha trabajado en este campo con el propósito de evaluar la posibilidad del desarrollo de esta reacción en Argentina. Para llevar a cabo este estudio se seleccionaron muestras de rocas dolomíticas procedentes de diferentes provincias de Argentina (Córdoba, Buenos Aires, Jujuy y Río Negro). La reactividad alcalina potencial de estas rocas fue evaluada mediante un gran número de ensayos (ASTM C 586, CSA A23.2-26A, IRAM 1637, IRAM 1674, métodos de Larbi & Hudec, CSA A23.2-14A, RILEM AAR-2 y AAR-5, DRX, microscopía óptica y electrónica de barrido). Los estudios han puesto de manifiesto la existencia de una dolomía de grano fino, con minerales arcillosos, que reacciona con los álcalis contenidos en el hormigón, mediante un mecanismo expansivo muy similar al de la RAC. Como resultado del ataque alcalino, esta roca experimenta una clara reacción química (dedolomitización), produciendo calcita y brucita. Sólo se observó gel silíceo de manera esporádica y en muy pequeñas cantidades, lo que hace difícil explicar cómo las expansiones observadas en los testigos de roca o en los prismas de mortero u hormigón puedan estar relacionadas con la RAS. Uno de los hallazgos más interesantes de esta investigación es que las adiciones minerales activas y los aditivos químicos a base de litio no fueron capaces de mitigar la expansión del hormigón. Es la primera vez que esta reacción es citada en un país que no sea EEUU, Canadá o China. Esta investigación prueba que el desarrollo de la RAC en nuestro país es posible, lo cual, plantea la necesidad de incluirla en nuestros reglamentos de construcción, tratándola cómo un tipo particular de reacción álcali-agregado.

En la mama normal, LIF es el principal activador del factor de transcripción STAT3,responsable de inducir la apoptosis del epitelio secretorio durante la involución. En el cáncer de mama STAT3 se encuentra frecuentemente activo aunque su rol biológico es aún controversial. En este trabajo nos propusimos evaluar si el LIF producido localmente es responsable de la activación de STAT3 en tumores mamarios murinos. Por estudios in vivo e in vitro determinamos que LIF se sobre-expresa en estos tumores, donde actúa como principal activador de STAT3. Encontramos además que LIF ejerce un efecto opuesto en células normales y tumorales, inhibiendo e induciendo, respectivamente, la supervivencia celular. A continuación, decidimos evaluar si el estrés mecánico inducido por la acumulación de leche al final del amamantamiento dispara la expresión de factores relevantes en la involución y tumorigénesis mamaria. Para ello, diseñamos un dispositivo que permite “estirar” radialmente células creciendo en cultivo sobre membranas elásticas. Encontramos que el estímulo mecánico es capaz de disparar en células mamarias la activación de cascadas de señales y la expresión de genes fundamentales en la involución y el desarrollo tumoral. En conjunto, nuestros resultados brindan nuevas evidencias de la importancia de los factores locales en la regulación de procesos normales y patológicos de la glándula mamaria.

Las células madre embrionarias (ESCs) son células derivadas del macizo celular interno (ICM) del blastocisto. Poseen la capacidad de auto-renovarse indefinidamente en cultivo y de dar origen a células de las tres capas germinales, propiedad conocida como pluripotencia. Existen tres factores de transcripción fundamentales para la regulación génica de las células madre pluripotentes, Oct4, SOX2 y Nanog. Estudios de inmunoprecipitación de la cromatina (ChIP) han revelado que estos factores ocupan al mismo tiempo las regiones promotoras de diversos genes a lo largo de todo el genoma, sugiriendo que estos factores actúan como el núcleo de una red regulatoria que modula la expresión de genes involucrados en la diferenciación celular. Mientras que in vitro las ESCs pueden ser mantenidas indefinidamente en estado indiferenciado, in vivo, conforme progresa el desarrollo, las células del ICM abandonan su estado pluripotente para seguir diversos programas de diferenciación. El inicio de dichos programas depende, en gran medida, de la regulación de la expresión de genes tejidoespecíficos. Sin embargo, entender cuáles son estos genes y cómo son regulados no es suficiente para explicar el comienzo del proceso de diferenciación celular. Existen además, cambios en la organización de la cromatina a nivel global y de loci específicos, registrándose múltiples evidencias que relacionan la estructura de la cromatina de los genes marcadores de estadio indiferenciado con el mantenimiento de la pluripotencia. Nuestra hipótesis postula que existiría una relación bidireccional entre los niveles y la actividad de proteínas que remodelan la cromatina y de los factores de transcripción críticos en el mantenimiento de las propiedades de las células pluripotentes. El objetivo general de este trabajo es contribuir al esclarecimiento de la regulación epigenética que ocurre en las ESCs durante la diferenciación y el estado epigenético de éstas cuando son mantenidas en estado indiferenciado. Para ello, nos propusimos, en primer lugar analizar el patrón de expresión de proteínas modificadoras de la cromatina en ESCs indiferenciadas y en distintos estadios de diferenciación. Luego, una vez detectados genes de interés,evaluar el efecto de la modificación de sus niveles de expresión sobre el mantenimiento del estado indiferenciado y en la diferenciación de las ESCs. Por último, nos propusimos estudiar si los factores de transcripción relevantes en la preservación de la pluripotencia regulan la expresión los genes en estudio. Para nuestro primer objetivo, analizamos la expresión de enzimas relacionadas con el remodelado de la cromatina mediante RT-qPCR en ESCs indiferenciadas y las comparamos con la de células terminalmente diferenciadas. Posteriormente, diferenciamos ESCs mediante un protocolo no dirigido y analizamos la expresión de estos genes lo largo del proceso de diferenciación. Esta búsqueda arrojó una serie de genes candidato que podrían tener un rol en el mantenimiento de las propiedades básicas de las ESCs. Posteriormente, elegimos uno de estos genes, la metiltransferasa Prmt8, para continuar nuestros estudios. Los otros genes que surgieron de este análisis forman parte de otros proyectos de tesis. Utilizando tanto un protocolo de diferenciación no dirigido como uno dirigido hacia linaje neural, comprobamos que el gen de Prmt8 se regula negativamente durante el proceso de diferenciación. Por otra parte, construimos una línea estable de mESCs que contiene en su genoma un shRNA inducible contra Prmt8. Probamos que al inducir este shRNA los niveles de mensajero de esta enzima disminuyen, y que esto en un principio no afecta la capacidad de autorenovación de las células. Mediante análisis de inmunofluorescencia estudiamos la presencia y localización de marcadores del estado indiferenciado. No encontramos diferencias sustanciales en los marcadores analizados al comparar las células cultivadas en presencia del inductor del shRNA con las células control. Por otro lado, diferenciamos la línea que sub-expresa Prmt8 y encontramos que estas células parecen diferenciarse de forma diferente al control. Por último, analizamos si la expresión forzada de los factores de transcripción de pluripotencia modula la expresión de Prmt8 en un sistema heterólogo. En conjunto los datos sugieren que Prmt8 es regulado positivamente por los factores de transcripción de pluripotencia, y modulado durante la diferenciación, hecho que podría ser clave en la determinación del tipo celular de destino. En el futuro planeamos realizar estudios de inmunoprecipitación de la cromatina para estudiar la interacción de estos factores con el promotor de Prmt8. Por otra parte, nos interesa estudiar con mayor profundidad si la presencia de esta metiltransferasa es vital para la diferenciación hacia algún tipo celular en particular. Creemos que los conocimientos generados en el campo de la epigenética de células madre pueden contribuir a plantear estrategias que ayuden, en un futuro, a diseñar nuevas terapias celulares.

La tuberculosis (TB) es la primera causa de muerte en pacientes HIV+. La infección por Mycobacterium tuberculosis induce la activación de células T CD8+, sin embargo, aún se desconoce si estas células pueden mediar protección contra esta enfermedad. Durante la infección por HIV, que incrementa dramáticamente el riesgo a desarrollar TB, los linfocitos T CD4+ específicos para M. tuberculosis disminuyen drásticamente. Por lo tanto, la caracterización de las respuestas T CD8+ en pacientes coinfectados con TB y HIV podría revelar potenciales blancos terapéuticos para el desarrollo de terapias adyuvantes. En el presente trabajo de tesis caracterizamos las respuestas T CD8+ específicas contra M. tuberculosis en pacientes coinfectados con TB y HIV-1 (HIV-TB) a través del estudio de la distribución de las poblaciones de memoria y efectoras en células T CD8+ por citometría de flujo y de la caracterizaron de las respuestas antígeno-específicas mediante la estimulación ex vivo con antígenos de M. tuberculosis en estos pacientes. A su vez, evaluamos el rol de la activación de los macrófagos y de la vía de PD-1 sobre la función citotóxica de las células T CD8+, para lo cual desarrollamos un sistema in vitro que nos permitió evaluar las respuestas T CD8+ citotóxicas específicas contra M. tuberculosis utilizando macrófagos diferenciados de monocitos como células blanco. Llamativamente, los pacientes HIV-TB mostraron una inhibición de las respuestas T CD8+ específicas para M. tuberculosis asociada a una diferenciación deficiente en comparación con dadores sanos y pacientes HIV+. Específicamente, las células diferenciadas terminalmente mostraron un fenotipo poco diferenciado, con menor expresión de la molécula CD45RA. A su vez, el porcentaje de estas células correlacionó positivamente con la expresión de PD-1 en células CD27+, sugiriendo que el agotamiento y la diferenciación deficiente en células T CD8+ están asociados en el marco de la coinfección HIV-TB. Estudios previos de nuestro grupo mostraron que los pacientes HIV-TB presentan un desbalance en los niveles de hormonas adrenales inmunomoduladoras, como el cortisol y la dehidroepiandrosterona (DHEA). A su vez, trabajos previos demostraron que la administración de DHEA incrementa respuestas específicas contra M. tuberculosis y otros patógenos en modelos murinos y durante la TB activa en humanos. Nosotros observamos que el nivel plasmático de DHEA correlacionó positivamente con el porcentaje de células T CD8+ diferenciadas terminalmente, lo que sugiere que el desbalance endócrino asociado a la coinfección por HIV y TB contribuye a la disfunción de estas células. Posteriormente, evaluamos el efecto modulador de DHEA sobre la función y el estado de diferenciación de células T CD8+. Así, DHEA incrementó las respuestas T CD8+ específicas para M. tuberculosis como también su diferenciación terminal in vitro. Con el objeto de estudiar el rol de la activación de los macrófagos y de la vía de PD-1 sobre la función citootóxica de células T CD8+, establecimos un sistema in vitro para evaluar las respuestas T CD8+ citotóxicas específicas contra M. tuberculosis utilizando macrófagos diferenciados de monocitos como células blanco. Mediante este ensayo pudimos detectar la citotoxicidad específica contra diversos estímulos incluidos antígenos de M. tuberculosis. A su vez, este método nos permitió determinar que la degranulación citotóxica es el principal mecanismo involucrado en la citotoxicidad producida durante el co-cultivo de células T CD8+ aisladas con macrófagos diferenciados in vitro. Los resultados mostraron que la activación por IFN-γ, que induce una polarización de los macrófagos hacia un perfil M1, incrementó notablemente la citotoxicidad antígeno-específica inducida por células T CD8+ sobre macrófagos diferenciados in vitro en comparación con los macrófagos no activados o activados alternativamente. A su vez, la expresión de PD-L1 en los macrófagos se incrementó prominentemente luego de su activación con IFN-γ. En concordancia con esto, tanto la expresión de PD-L1 en monocitos/macrófagos como la expresión de PD-1 en células T CD8+ provenientes de derrames pleurales de pacientes con pleuritis tuberculosa se vio incrementada notablemente respecto de su expresión en células de sangre periférica, indicando que la vía de PD-1 se encuentra inducida en el sitio de infección durante la pleuritis tuberculosa. Finalmente, observamos que la inhibición de la vía de PD-1/PD-L1 mediante el bloqueo de PD-L1 incrementó la citotoxicidad específica inducida por células T CD8+ tanto en macrófagos no activados como en macrófagos activados por IFN-γ. Por el contrario, el bloqueo de PDL-1 no tuvo efecto sobre la citotoxicidad ejercida sobre macrófagos polarizados hacia un perfil M2. En su conjunto, los resultados del presente trabajo de tesis muestran que la función citotóxica específica contra M. tuberculosis es deficiente en las células T CD8+ de pacientes coinfectados con HIV y Tuberculosis. A su vez, observamos que el desbalance hormonal característico de estos pacientes contribuye a la disfunción que presentan estas células y pudimos probar la capacidad de la hormona adrenal DHEA para restaurar, al menos parcialmente, esta función. Finalmente, determinamos la importancia de la activación de los macrófagos hacia un perfil M1 sobre la capacidad citotóxica de las células T CD8+, así como el rol inhibitorio de esta función por parte de la vía PD-1/PD-L1, mediante el desarrollo de un método fehaciente para evaluar la citotoxicidad in vitro. Así, nuestros hallazgos contribuyen al conocimiento de la inmunopatología Tuberculosa en pacientes infectados con HIV, ayudando a dilucidar los procesos que subyacen a la mayor susceptibilidad a la Tuberculosis en estos pacientes. Asimismo, nuestros resultados ratifican la importancia de la inmunidad mediada por células T CD8+ durante la infección tuberculosa, contribuyendo al conocimiento de estas células como posibles blancos terapéuticos en el desarrollo de mejores tratamientos para la TB en pacientes HIV+ así como de una tan necesaria vacuna efectiva contra la Tuberculosis.