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El presente trabajo de tesis tuvo por objetivo principal estudiar la regulación del transporte de glucosa en células tiroideas. Se utilizó un análogo no metabolizable de la glucosa, la 2-deoxiglucosa, a fin de determinar la actividad de transporte de glucosa en la línea celular FRTL-5. Se encontró que tanto la insulina como la TSH estimulan el transporte, y que juntas a 72 horas tienen un efecto sinérgico, mientras que a tiempos cortos el efecto de la interacción es aditivo. La forskolina reproduce el efecto de la TSH indicando que esta actúa por la vía de la proteína kinasa A (PKA). El IGF-1 tiene un efecto similar a la insulina, aunque no tan potente. El forbol miristato acetato (PMA) estimula el transporte de 2-DOG, indicando que este transporte es también regulado por la vía de la PKC. Se encontró que el efecto de la insulina es revertido parcialmente por un inhibidor de PKC, la staurosporina. Además se verifica aditividad entre la vía de la PKA y la vía de la PKC. Los yodoaraquidonatos IL-δ e ILω, que son hipotéticos intermediarios del fenómeno autorregulatorio, inhiben el transporte estimulado por TSH, insulina o ambas hormonas.

El gen de proopiomelanocortina (POMC) se expresa en un grupo de neuronas hipotalámicas, en otras del tallo encefálico y en melanotrofos y corticotrofos hipofisarios. La expresión en cada uno de estos grupos está controlada por distintas secuencias regulatorias. Para estudiar la regulación transcripcional de POMC en neuronas hemos producido una serie de ratones transgénicos conteniendo regiones flanqueantes de este gen. Los resultados obtenidos indican que secuencias 5’ distales del gen de POMC dirigen la expresión al sistema nervioso central de ratones transgénicos bajo un control temporal y espacial preciso. Las neuronas de POMC liberan β-endorfina (β-EP), un péptido opioide endógeno al que le han sido atribuidas una gran cantidad de funciones. Para determinar más precisamente la contribución de β-EP a respuestas opioides, se utilizaron ratones deficientes en este péptido. Los estudios se dirigieron a investigar la participación de la β-EP en los mecanismos de control del peso corporal y la relación existente entre este neuropéptido y el consumo de alcohol. Observamos que los ratones deficientes en β-endorfina (β-EP -/-) alcanzan luego de la pubertad un mayor peso corporal que sus hermanos normales, y esto se debería, en parte, a una alteración en la liberación de oxítocina que genera un aumento en la liberación de leche. Investigamos la respuesta de los ratones β-EP -/- al etanol analizando el efecto de la droga sobre la locomoción horizontal y la coordinación motora. El análisis de los resultados mostró una marcada diferencia en la respuesta al etanol, indicando la participación del sistema endorfinérgico en esta respuesta.

Las aves representan un eslabón fundamental en la economía internacional. A nivel mundial, alrededor del 40% de la carne consumida es de origen aviar. La industria avícola ha experimentado en los últimos años un crecimiento muy importante tanto dentro del mercado local como del internacional, permitiendo ubicar a la Argentina en el octavo lugar como exportador mundial de carne de pollo junto con otros productos. El tipo de crianza intensiva utilizada dentro de la producción avícola facilita la aparición de factores que perjudican la estabilidad de los planteles, afectando si status sanitario. Por otra parte, tanto las enfermedades respiratorias como las inmunosupresoras suelen estar íntimamente asociadas con este tipo de crianza. El virus de la Bursitis Infecciosa Aviar (IBDV) es un patógeno de alta relevancia en la producción avícola debido a que causa, entre otros efectos, inmunosupresión, dejando así a los animales propensos a nuevas infecciones. El blanco principal del IBDV es la bursa de Fabricio, órgano exclusivo de las aves, donde se desarrollan y maduran los linfocitos B. En el presente trabajo de tesis doctoral se abordó el estudio de la respuesta inmune inducida por cepas de virulencia intermedia, habitualmente utilizadas como vacunas, en el hospedador natural. Se analizaron distintas facetas como la inducción de la expresión de citoquinas en distintos órganos, la capacidad de proliferación de linfocitos y las poblaciones celulares involucradas. Se estudiaron las vías de inoculación oral e intramuscular, habitualmente utilizadas en la vacunación comercial siendo la oral la vía de entrada natural del virus. Los resultados mostraron que altas dosis de virus de cepas intermedias son capaces de imitar efectos reportados con cepas de mayor virulencia como son: una fuerte infiltración de linfocitos T en la bursa de Fabricio (analizada por citpmetría de flujo), junto con una sobreexpresión de interleuquina 6 e inter ferón gama en este órgano (analizado por RT-PCR en tiempo real) e inmunosupresión (corroborada en ensayos de coinfección con otro agente viral aviar). La segunda parte del presente trabajo de tesis se abocó al estudio de la proteína no estructural VP5 de IBDV. Su función ha sido ampliamente discutida en la bibliografía respecto a su actividad apoptótica, ya que parece tener efectos opuestos en distintos estadíos del ciclo de replicación viral. Por otra parte, también existen reportes ambiguos respecto a su localización subcelular. En el presente trabajo, mediante ensayos in vitro y utilizando técnicas de Imaging, se determinó la localización de la proteína en la membrana plasmática no exponiendo ningún dominio al espacio extracelular, contradiciendo reportes que indicaban que se trataba de una proteína de transmembrana de clase dos. Los resultados obtenidos en el presente trabajo de tesis permitieron desarrollar un método de desafío sin utilizar cepas virulentas de IBDV. Asimismo se caracterizó una amplia variedad de efectos de cepas de virulencia intermedia del virus que, aunque son habitualmente utilizadas como vacuna, no habían sido descriptos hasta el presente trabajo de tesis. En la segunda parte, se determinó la localización de la proteína viral VP5. Estos resultados brindan un abanico de posibles mecanismos de acción de la misma, que luego de ser abordados posibilitarán el desarrollo de herramientas y estrategias sanitarias para combatir este importante patógeno aviar.

Las aves representan un eslabón fundamental en la economía internacional. A nivel mundial, alrededor del 40% de la carne consumida es de origen aviar. La industria avícola ha experimentado en los últimos años un crecimiento muy importante tanto dentro del mercado local como del internacional, permitiendo ubicar a la Argentina en el octavo lugar como exportador mundial de carne de pollo junto con otros productos. El tipo de crianza intensiva utilizada dentro de la producción avícola facilita la aparición de factores que perjudican la estabilidad de los planteles, afectando si status sanitario. Por otra parte, tanto las enfermedades respiratorias como las inmunosupresoras suelen estar íntimamente asociadas con este tipo de crianza. El virus de la Bursitis Infecciosa Aviar (IBDV) es un patógeno de alta relevancia en la producción avícola debido a que causa, entre otros efectos, inmunosupresión, dejando así a los animales propensos a nuevas infecciones. El blanco principal del IBDV es la bursa de Fabricio, órgano exclusivo de las aves, donde se desarrollan y maduran los linfocitos B. En el presente trabajo de tesis doctoral se abordó el estudio de la respuesta inmune inducida por cepas de virulencia intermedia, habitualmente utilizadas como vacunas, en el hospedador natural. Se analizaron distintas facetas como la inducción de la expresión de citoquinas en distintos órganos, la capacidad de proliferación de linfocitos y las poblaciones celulares involucradas. Se estudiaron las vías de inoculación oral e intramuscular, habitualmente utilizadas en la vacunación comercial siendo la oral la vía de entrada natural del virus. Los resultados mostraron que altas dosis de virus de cepas intermedias son capaces de imitar efectos reportados con cepas de mayor virulencia como son: una fuerte infiltración de linfocitos T en la bursa de Fabricio (analizada por citpmetría de flujo), junto con una sobreexpresión de interleuquina 6 e inter ferón gama en este órgano (analizado por RT-PCR en tiempo real) e inmunosupresión (corroborada en ensayos de coinfección con otro agente viral aviar). La segunda parte del presente trabajo de tesis se abocó al estudio de la proteína no estructural VP5 de IBDV. Su función ha sido ampliamente discutida en la bibliografía respecto a su actividad apoptótica, ya que parece tener efectos opuestos en distintos estadíos del ciclo de replicación viral. Por otra parte, también existen reportes ambiguos respecto a su localización subcelular. En el presente trabajo, mediante ensayos in vitro y utilizando técnicas de Imaging, se determinó la localización de la proteína en la membrana plasmática no exponiendo ningún dominio al espacio extracelular, contradiciendo reportes que indicaban que se trataba de una proteína de transmembrana de clase dos. Los resultados obtenidos en el presente trabajo de tesis permitieron desarrollar un método de desafío sin utilizar cepas virulentas de IBDV. Asimismo se caracterizó una amplia variedad de efectos de cepas de virulencia intermedia del virus que, aunque son habitualmente utilizadas como vacuna, no habían sido descriptos hasta el presente trabajo de tesis. En la segunda parte, se determinó la localización de la proteína viral VP5. Estos resultados brindan un abanico de posibles mecanismos de acción de la misma, que luego de ser abordados posibilitarán el desarrollo de herramientas y estrategias sanitarias para combatir este importante patógeno aviar.

La alergia a las proteínas de la leche de vaca (ALV) es la alergia alimentaria que se presenta con mayor prevalencia en el mundo y en nuestro país, pudiendo afectar hasta un 10% de la población pediátrica. En las últimas décadas se han producido cambios en la epidemiología de las reacciones alérgicas y, en particular, las alergias alimentarias han despertado una especial atención porque constituyen lo que se ha llamado la segunda ola epidémica de alergia. Además, se ha agravado la forma en que se presentan, reportándose mayor incidencia de anfilaxias causadas por alimentos. Por estos motivos, existe un marcado interés en comprender la fisiopatogenia de estos desórdenes inflamatorios y el desarrollo de terapias correctivas del defecto inmunológico que se produce en estos pacientes. Dado que las reacciones IgE-dependientes son las más prevalentes y las que originan reacciones anafilácticas, resulta crítico comprender las bases moleculares y celulares de la síntesis de la IgE. En el presente trabajo de Tesis se decidió abordar el estudio de la asociación entre la ALV y el desarrollo de pólipos juveniles (PJ) colorrectales en pacientes pediátricos que presentan sangrado rectal al momento del diagnóstico, e investigar la biología de la IgE. A partir de la caracterización del infiltrado inflamatorio alérgico que domina el estroma de los PJ, en los cuales la frecuencia de células mononucleares y eosinófilos está significativamente elevada, estudiamos distintos marcadores de una respuesta TH2-dependiente. Encontramos que las citoquinas tipo 2, interleuquina- (IL-) 4, IL-5 e IL-13, se encuentran significativamente elevadas en el estroma de los pólipos, como así también las alarminas IL-33 y TSLP, mediadores pro-inflamatorios que intervienen en las primeras etapas de una reacción alérgica. A partir de la historia clínica y los resultados positivos de la serología para IgE de los pacientes con PJ, estudiamos la localización y mecanismos de síntesis de la IgE. Encontramos centros germinales activos en la lámina propia de los PJ y marcadores biológicos que indican una síntesis local de IgE a través de mecanismos de recombinación para cambio de isotipo directo y secuencial. Asimismo, encontramos que en centros germinales individuales se sintetizan más de un isotipo de inmunoglobulina y que, según un análisis sin distinción del isotipo, se emplean genes variables de las familias VH1/7, VH3 y VH5 en la síntesis de las regiones variables de las cadenas pesadas. Como control se analizaron en todos los casos biopsias de tejido colónico adyacente a los pólipos, donde no encontramos un infiltrado inflamatorio, ni IgE, o citoquinas tipo 2. Por lo tanto, en el estroma de los PJ existen centros germinales en los que se sintetiza IgE, donde el nivel de IgE presente allí se correlaciona con la concentración de IgE presente en el plasma de cada individuo. Estos resultados en su conjunto permitirían alcanzar un mejor conocimiento de la regulación de los procesos alérgicos, de la localización y mecanismos de síntesis de IgE, y sobre la asociación entre el sangrado rectal, la presencia de pólipos colorrectales y la síntesis mucosal de IgE. Por lo tanto, es importante estudiar en pacientes con sangrado rectal la presencia de pólipos y la potencial asociación con una enfermedad alérgica para indicar la remoción de los pólipos, y definir una conducta terapéutica.

El termino Inteligencia Emocional (IE) se refiere a la capacidad de reconocer nuestros propios sentimientos y los ajenos, de motivarnos, y de manejar adecuadamente las emociones (Goleman, 1996). Estos aspectos surgen de trabajo de Salovey y Mayer (1990), quienes sostienen que la Inteligencia Interpersonal (II) es un área de la IE. La II se define como la capacidad para comprender a los demás: qué los motiva, cómo operan y cómo trabajar cooperativamente con ellos. En particular, la empatía es un aspecto de la inteligencia interpersonal, que se manifiesta en la habilidad que se posee para entender lo que están sintiendo otras personas y ubicarse en situaciones desde su perspectiva. Esta habilidad social, favorece el liderazgo, facilita el trabajo en equipo y puede contribuir a persuadir, dirigir y resolver situaciones que promuevan la cooperación. Se sostiene que la capacidad empática en los docentes de los primeros años de la universidad, influye de manera directa en la predisposición de los estudiantes hacia el estudio y cursado de las materias. Este trabajo involucró a docentes y estudiantes de primer y segundo año de las carreras de Bioquímica y Licenciatura en Biotecnología de la Universidad Nacional del Litoral. Se estudió la influencia de la capacidad empática de los docentes, en el desempeño académico de los estudiantes, teniendo en cuenta la promoción-aprobación de asignaturas. Se espera que los resultados de este estudio signifiquen un aporte para soslayar, en parte, el problema de la gran cantidad de estudiantes que abandona la universidad durante los primeros años.

El Programa Nacional de Vigilancia de Infecciones Hospitalarias de Argentina (VIHDA) permite la recolección sistemática de datos y el relevamiento de todos los episodios de infección relacionados a factores de riesgo en más de 130 nosocomios públicos y privados de Argentina. En 2010 la tasa de infección (TI) de neumonía asociada a ventilación mecánica (NAVM) en la Unidad de Terapia Intensiva Pediátrica (UTIP) del Hospital Público Descentralizado Dr. Guillermo Rawson (HPDDGR) de la Provincia de San Juan fue del 29,59 ‰, que superaba a la tasa global VIHDA (9,94‰) para el mismo periodo y procedimiento vigilado. En el año 2012 se diseñó un nuevo protocolo de profilaxis bucal (PB) que incorporó clorhexidina (CHX) 0,12% tópica como parte de las medidas de bioseguridad y prevención de NAVM en pacientes de UTIP del HPDDGR Objetivo: Conocer los efectos de CHX 0,12% aplicada en forma tópica cada 24 horas en PB sobre la TI de NAVM en pacientes de la UTIP del HPDDGR.

Fil:Hogert, Elsa Noemí. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

En el Canal Beagle, un proceso adaptativo humano a los recursos litorales marinos culminó con los conocidos canoeros magallanico fueguinos (yamanas y alacalufes). Su subsistencia se basó en recursos marinos (pinnípedos, cetáceos, aves, peces, moluscos y crustáceos), aunque incluyo recursos terrestres. Este estudio analizó la predación del hombre prehistórico sobre los pinnípedos, teniendo en cuenta: a) pautas de cacería determinadas sobre la base de conjuntos arqueofaunísticos (especie, sexo, edad, estacionalidad), b) la importancia de los pinnípedos en la dieta (rendimiento energetico) y c) el desarrollo de la relacion predatoria durante el tiempo. En la fase temprana de la adaptación (ca. 6000 años AP), el lobo fino sudamericano Arctocephalus australia representaba el 97% de las capturas de pinnípedos; el resto lo constituía principalmente el lobo marino de un pelo Otaria flavescens, aunque incluía al elefante marino del sur Mirounga leonina, y el leopardo marino Hydrurga leptonyx. El 85% de los lobos finos estaba constituido por machos, en su mayor parte juveniles. La proporcion de sexos se explicaría en base a aspectos relacionados a la ecología trófica de la especie y a la inversion maternal. El analisis del rendimiento energético indicó que frente a guanacos y aves y considerando que otros recursos habrían tenido caracter complementario, los pinnipedos habrían resultado el recurso principal a lo largo del proceso adaptativo. Se discuten aspectos de las dietas de cazadores recolectores marinos, concluyendo que el aporte de grasas por consumo de mamíferos marinos permitió una dieta basada en carnes y grasas. La simulación de la caza prehistórica sugiere que la cacería habría sido no selectiva y que los conjuntos faunísticos podrían haber sufrido decaimiento diferencial que alterara la estructura de edad de los mismos. Las pautas de caza aborigen no habrían alterado los stocks de pinnípedos. El arribo de los europeos cambio totalmente el modo de explotación sobre los lobos marinos, provocando una fuerte disminución del principal recurso energético de los canoeros. Esto habría constituído un importante factor en la extinción de esas etnias a principios del presente siglo.

En 1994 se descubrió que algunos cangrejos Uca uruguayensis de Punta Rasa, bahía Samborombón, estaban infestados por el isópodo bopírido Leidya distorta. Este parásito había sido previamente encontrado en otras especies del género Uca y en el cangrejo Ucides cordatus, sobre la costa atlántica entre New Jersey (EE.UU.) y Rio de Janeiro (Brasil). Con el fin de estudiar la interacción entre L. distorta y su hospedador, se recolectaron mensualmente ejemplares de Uca uruguayensis en Punta Rasa, bahía Samborombón, desde febrero de 1995 hasta marzo de 1996. Se emplazaron 5 estaciones; en cada fecha de muestreo y en cada estación se trazaron dos transectas de 5 m de largo por 0,2 m de ancho, orientadas en la dirección de la pendiente de la playa. Las transectas fueron excavadas hasta una profundidad de 30 cm. Los cangrejos fueron separados a mano, fijados en formalina 5% y conservados en etanol 70%. De un total de 12.033 cangrejos recolectados a lo largo de los 14 meses de muestreo, 1.115 (9,3%) estaban infestados por algún estadio de L. distorta. El estudio de estos estadios permitió seguir el desarrollo del parásito en su hospedador definitivo. Cuando una larva criptonisquia invade una cámara branquial desocupada, se asienta en el espacio limitado por dos laminillas branquiales contiguas. Un tiempo después la criptonisquia muda al estadio bopyridium, el que permanece entre las laminillas branquiales. Este último es sucedido por varios estadios juveniles hembra, que se fijan al techo de la cámara branquial. Al alcanzar un cierto grado de desarrollo la hembra juvenil atrae a otra criptonisquia, que a poco de asentarse sobre su cuerpo deviene macho. Los machos van cambiando de posición sobre las hembras a medida que éstas crecen. Las hembras adultas son asimétricas y ocupan la mayor parte de la cámara branquial; se orientan con la cabeza hacia atrás, el vientre hacia arriba y el dorso contra las branquias del cangrejo. Estas hembras obtienen hemolinfa de un gran vaso horizontal que corre por debajo del epitelio interno del branquiostegito del cangrejo. El porcentaje de cangrejos infestados (prevalencia) por L. distorta varió entre 5,24% y 17,8% a lo largo de los l4 meses de muestreo. Todos los estadios del parásito fueron más abundantes en los cangrejos grandes. Siendo que los machos de U. uruguayensís alcanzan mayor talla que las hembras, la prevalencia fue mayor entre los primeros. Los cangrejos macho infestados mayores que 10,5 mm, si bien representaron solo 5,92% de los cangrejos recolectados, hospedaron 68,8% del total de parásitos. Las larvas criptonisquias fueron mucho más frecuentes entre los cangrejos que estaban mudando (blandos) que entre los cangrejos en intermuda (duros). La distribución estadística de las criptonisquias en los cangrejos en intermuda fue “agrupada” o “contagiosa”, en conformidad con el modelo binomial negativo. Los cangrejos infestados sufren varias alteraciones morfológicas. Aquellos que albergan un parásito hembra adulto a menudo presentan un área despigmentada sobre la pared lateral del caparazón. Un área despigmentada adicional se observa algunas veces en el fondo del surco ocular. Las hembras adultas del parásito producen un ligero abultamiento de la cámara branquial del hospedador, siendo esta deformación más marcada en los cangrejos pequeños. Las branquias de los cangrejos parasitados pueden estar deformadas: la hembra adulta de L. distorta tiene una robusta carena dorsal que encaja entre las branquias 4ta. y 5ta. del cangrejo, desplazándolas lateralmente. Por último, L. distorta inhibe el crecimiento alométrico del quelípedo mayor de los cangrejos macho: en los machos parasitados por hembras adultas el quelípedo mayor fue en promedio 6,5% más corto que en los no parasitados. La densidad de U. uruguayensis varió entre 133 y 207 ind./m² a lo largo del año. Los machos representaron 61,6% del total de individuos recolectados. Entre los cangrejos pequeños la razón de sexos fue 1:1, entre los medianos predominaron las hembras y entre los grandes prevalecieron los machos. La población presenta un componente de individuos adultos de tamaño grande que permanece estable a lo largo de todo el año. Los cangrejos se reproducen desde noviembre hasta febrero, dando lugar cada año a una nueva cohorte. Las hembras de L. distorta se reprodujeron activamente durante la primavera tardía y el verano. En otoño la actividad reproductiva fue decreciendo, de tal suerte que para el invierno todas las hembras adultas tenían sus marsupios vacíos. El crecimiento de los parásitos inmaduros se detuvo en invierno y recomenzó en primavera. En octubre-noviembre ya no quedaban criptonisquias en los cangrejos; aquellas larvas que sobrevivieron al invierno mudaron al estadio bopyridium al comienzo de la primavera y luego crecieron con rapidez, para reproducirse en diciembre o enero. La taxonomía de la superfamilia Bopyroidea ha sido establecida sobre la base de la forma de los adultos, sin prestar mayor atención a los estadios larvales. Sin embargo, la clasificación de los Bopyroidea está lejos de ser estable, dado que los individuos adultos muestran amplias variaciones aun dentro de una misma especie. En un esfuerzo por encontrar criterios más confiables para la clasificación de las especies del grupo, se describen en detalle las larvas epicarídea y criptonisquia de Leidya distorta. La larva criptonisquia de L. distorta tiene pleópodos unirramosos y urópodos con una larga seda caudal. En la literatura se encuentran descriptas tres criptonisquias que comparten estas características. Una es Cancricepon elegans que, al igual que L. distorta, pertenece a la subfamilia Ioninae. Otra, no identificada, fue encontrada en la desembocadura del río Tocantins, Brasil. La tercera fue asignada a Probopyrus bithynis, aunque su identidad específica es dudosa. El género Leidya contiene 4 especies, siendo Leidya bimini de las islas Bermudas la más próxima a L. distorta. Los adultos de estas dos especies se diferencian principalmente por la posición, más central o lateral, de los tubérculos que conforman la carena torácica dorsal. Las criptonisquias de L. bimini y L. distorta difieren en la longitud de las sedas caudales, hecho que refuerza la validez de estas especies.