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Plasmodium falciparum es el parásito que causa la malaria más severa en humanos, enfermedad que afecta mundialmente a 200–300 millones de individuos al año. La descripción del genoma, del transcriptoma y del proteoma son un recurso importante para poder entender la función y la regulación de la expresión génica. En el caso del parásito P. falciparum, el 60% de los genes anotados siguen siendo hipotéticos, debido a la gran distancia evolutiva del parásito respecto de organismos modelo. Por otro lado, la presencia y abundancia de un ARNm no necesariamente se correlaciona con la abundancia de la proteína correspondiente y la cuantificación de estos parámetros son por lo tanto representaciones imperfectas de la regulación génica y proteómica subyacente. En esta tesis se establece la conexión entre ARNm y proteína midiendo directamente la traducción a nivel genómico usando la técnica de perfilamiento ribosomal, revelando por primera vez la dinámica de este proceso durante los estadíos intraeritrocíticos del parásito. Los resultados obtenidos demuestran que los procesos de transcripción y traducción están estrechamente acoplados, que el 11% del transcriptoma está regulado traducciónalmente y que este tipo de regulación juega un rol importante en genes con funciones de egreso e invasión del merozoito. Además, se presenta un conjunto de métodos mejorados para la manipulación genética a escala genómica de P. falciparum. Este conjunto de protocolos puede ser aplicado para la investigación y descubrimiento de la función de los genes del parásito.

Fil:Gabitto, Jorge Federico. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

Fil:Mandelbaum, Adolfo Jorge. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

Se efectúa un estudio bibliográfico y de él surge la evidencia de que los trabajos realizados en este tema son algunos de tipo empírico y los más postulan modelos para sistemas porosos determinados que son o escasamente generalizados de aplicacion limitada o bien puramente analíticos. Por ello se busca la realizacion de un modelo teórico general aplicado a sistemas electroquímicos que responda al arreglo experimental más frecuente. El presente trabajo consta fundamentalmente de dos partes, una teórica y otra experinental. En la primera se realiza un análisis teórico del proceso difusional. Tomando como base las dos leyes de Fick se llegan a desarrollar tres modelos teóricos, siendo el tercero el más general en el cual quedan incluídos los otros dos. El fenómeno que se considera es una difusión unidireccional a través de uno y dos medios porosos sucesivos, pudiéndose extender el tercer modelo a tres medios de porosidades diferentes. Se deducen ecuaciones adimensionales que luego son graficadas, obteniéndose perfiles de concentración dentro del sólido poroso, y curvas de procesos difusionales donde entran en juego más de dos medios de distinta porosidad, que pueden aplicarse a cualquier fenómeno de transferencia. Se preveen dos métodos para la determinación de la porosidad (ε), tortuosidad (ζ), y difusividad efectiva (De), del material poroso utilizado. La segunda sección esencialmente experimental se realiza a fin de comprobar el cumplimiento del desarrollo teórico. En celdas electrolíticas construídas ad-hoc para los sistemas ensayados (Fe(CN)6K3-Fe(CN)6K4/HONa; SO4Cu/SO4H2; SO4Cu/Glicerina/SO4H2), se efectúa un estudio con placas modelo poniendo en juego las principales variables del proceso (Sistema, concentración, espesor de placa y diámetro de poro). Previamente se determinaron curvas de polarización en las condiciones de trabajo, para ubicar con precisión al "plateau" de corriente límite. Mediante un programa estadístico se analiza la influencia relativa de aquellas variables involucradas en el proceso y las condiciones óptimas para aplicar el método de menor error a diafragmas y lechos porosos. Se llega a las siguientes conclusiones: 1.- El mecanismo difusional se manifiesta como lo expresa el tercer modelo teórico. 2.- La porosidad (ε), turtuosidad (ζ), y difusividad efectiva (De), de diafragmas y lechos porosos, se pueden determinar simultaneamente en corto tiempo, por una técnica electroquímica, con los métodos desarrollados en el análisis teórico. 3.- Ninguna de las variables principales que intervienen en el proceso difusional tienen influencia sobre las condiciones óptimas a utilizar en los métodos presentados. 4.- El error en la determinacion es inferior al ±1%. 5.- Restricciones: a) El hecho de utilizar un método electroquímico limita los materiales a ensayar al grupo de los no-conductores. b) Las placas o diafragmas porosos utilizados deben apoyar perfectamente sobre el electrodo, requisito que indica sean placas planas (geometría utilizada en el tercer modelo). c) El diámetro de poro de las pastillas no debe ser tan pequeño como para dar lugar a difusividades peliculares medibles. El estudio realizado sobre la difusión y los métodos desarrollados para la determinación de ε, ζ y De se aplicaron a 7 diafragmas de vidrio y 3 lechos de esferas de vidrio. Se superponen a las curvas teóricas adimensionales las experimentales obtenidas con los diafragmas y lechos porosos observándose el cumplimiento del modelo teórico. Los datos de ε de los diafragmas, obtenidos por la técnica electroquímica, se comparan con la porosidad determinada según el método de imbibición con agua y en el caso de los lechos se hace la comparación con porosidades obtenidas por pesada. Las tortuosidades de los diafragmas se cotejan con las halladas por conductividad. Se realiza un nexo entre los autores que utilizan la terminología "Capa de Difusión" y el presente trabajo. Finalmente se ensaya con tres medios sucesivos para corroborar la extensión que es posible efectuar en el tercer modelo presentado. El haberlo confirmado de manera experimental, siendo posible abarcar casos que van desde un medio semiinfinito hasta 'sistemas sandwich' y extenderlo a tres medios sucesivos de porosidades diferentes, reitera su generalidad y permite aceptar como válidos los "Métodos para la determinación de ε, ζ y De", que de él se deducen.

Fil:Xifra, Hortensio Alfredo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

Fil:Cano, Jorge Antonio. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

Fil:Terrizzano, Marcelo Manuel. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

En la presente Tesis se utilizan diversas técnicas experimentales, principalmente fotofïsicas, para estudiar la transición sol-gel de sistemas basados en titania. La sintesis de los mismos se realizó en diversos medios -acuoso, alcohólico y en micelas inversas- a partir de la hidrólisis de Ti(OBnu)4. Se empleó una variedad de sondas ópticas en estudios de anisotropía de fluorescencia y optoacústica, obteniéndose información sobre cambios de microviscosidad y de la evolución de las cavidades formadas al desarrollarse redes de polímeros o de nanopartículas de titania, según el tipo de gel. Complementariamente se utilizaron técnicas de caracterización de los materiales obtenidos: espectoscopía IR y UV-visible, difractometría de RX, mediciones con balanza de cuarzo y de viscosidad macroscópica. Las características del material obtenido dependen del medio en el que se realiza la síntesis. En cada caso se discute el tipo de estructura obtenida. La variación de los parámetros viscoelástícos, microscópicos y macroscópicos, durante la transición sol-gel se analiza empleando modelos de percolación.

El presente trabajo de tesis está dedicado al estudio de los mecanismos de transmisión de constantes de acoplamiento F-F, C-F, P-P, Se-Se y Se-H en distintos compuestos. En especial, se analiza el mecanismo "through space", que en la mayoria de los casos estudiados resulta ser predominante. Para hacer estos estudios se recurre al método de las proyecciones internas del propagador de polarización, IPPP, implementado junto con el método INDO.El mismo permite hacer cálculos de molécula completa y por fragmentos, por lo cual los distintos mecanismos de transmisión se analizan eligiendo convenientemente el fragmento involucrado. Para poder llevar a cabo varios de estos cálculos, se modificó el método IPPP, ya sea extendiendo la base atómica o introduciendo una nueva parametrización. También se recurrió al método PCILO, para hacer estudios conformacionales, debiendo modificarlo para incluir nuevas parametrizaciones. En esta tesis, también se desarrolla un método para estudiar corrimientos quimicos de carbono. El mismo permite hacer cálculos UCHF y CHF, con base de orbitales atómicos invariantes de medida (GIAO), incluyendo integrales tricéntricas. La subrutina necesaria para calcular esas integrales se desarrolla comoparte de esta tesis. El método implementado permite también hacer cálculos de molécula completa y por fragmentos. En el caso de las constantes de acoplamiento estudiadas, se encuentran buenos resultados, encontrándose para ellas una interpretación de sus mecanismos de transmisión. En cuanto al estudio del corrimiento quimico del carbono, si bien los resultados encontrados no son satisfactorios, el método desarrollado para su análisis abre interesantes perspectivas para cálculos futuros.

La toxoplasmosis congénita, es la segunda infección transplacentaria más frecuente. Y cuando sucede, existen altas probabilidades de afección de la salud del futuro niño. Pero la toxoplasmosis congénita sólo es posible cuando la madre se encuentra en la fase aguda de la toxoplasmosis. En tales casos, hay tratamientos para evitar que el parásito alcance al gestante, pero estos son peligrosos. Por ello, no deben indicarse a menos que se tenga total seguridad de que la mujer se encuentra en la fase aguda de la infección. En el presente trabajo se evaluaron diferentes regiones de las proteínas P22, P30 y P35 (específicas de la fase aguda) del parásito Toxoplasma gondii, como antígenos recombinantes en ensayos de diagnóstico clínico para diferenciar las fases de la infección. Las diferentes regiones se ensayaron por separado en ELISAs indirectos detectando individualmente anticuerpos específicos IgG, IgA e IgM; en ensayo de avidez; en dot blot y en dot blot semicuantitativo. Además, se realizó un estudio de las proteínas a través de bioinformática. Mediante el cual se consiguió explicar los diferentes resultados de los ensayos experimentales, principalmente logrando ubicar las regiones antigénicas de las proteínas. Respecto a la detección de la fase aguda de toxoplasmosis, se obtuvieron resultados significativos empleando las secuencias antigénicas denominadas P22c y P35B; con la detección de IgG mediante ELISA y con el ensayo de avidez. Inclusive se alcanzó una sensibilidad y especificidad del 100 % al medir avidez de los anticuerpos contra P35B