Catálogo de publicaciones

El presente trabajo de Tesis tiene por objeto: 1 - Caracterizar, desde el punto de vista cinético y estequiométrico, el crecimiento y la producción de antígenos de B. pertussis en medio líquido. 2- Determinar las razones que conducen a la pérdida de actividad hemaglutinante en sobrenadantes de cultivos sometidos a agitación. Establecer si dicha pérdida de actividad está relacionada con hemaglutinina filamentosa, toxina pertussis o ambas, y si los antígenos celulares se ven afectados de alguna manera por las características fluidodinámicas del cultivo. 3- Estudiar cómo influye la velocidad específica de crecimiento sobre la estructura de la membrana externa, la producción de células y antígenos, y los niveles endotóxicos 4- Evaluar la respuesta fisiológica de B. pertussis frente a cambios en el nivel de oxígeno del entorno y en la disponibilidad de determinados nutrientes que podrían ser sustratos limitantes del crecimiento in vivo. Comparar estos últimos resultados con los obtenidos en medio SS, en el cual la limitación del crecimiento es de tipo energética. A partir de estos estudios, se pretende estar en condiciones de determinar si el manejo del medio de cultivo y condiciones de operación puede constituir una estrategia válida para mejorar la calidad y cantidad de antígenos obtenidos a partir del cultivo de B. pertussis. Paralelamente, se espera que los resultados obtenidos contribuyan al esclarecimiento de algunos aspectos de la fisiología de este microorganismo.

En la fase aguda de la enfermedad de Chagas, la infección por T. cruzi produce una intensa respuesta inflamatoria en diversos tejidos del organismo incluso en el corazón, donde los miocardiocitos constituyen un importante blanco. Si bien la reacción inflamatoria es importante para el control inicial de la infección, un desequilibrio o una mala resolución de la misma puede generar daños y alteraciones en la funcionalidad cardíaca. Las células cardíacas responden a la infección mediante la expresión de enzimas inflamatorias como óxido nítrico sintasa 2 (NOS2) y metaloproteasas (MMPs) y citoquinas como TNF-α e IL-6. Esta respuesta está mediada por la activación de vías de señalización que incluyen al factor de transcripción nuclear-ĸB (NF-ĸB) y a las quinasas reguladas por señales extracelulares-proteínas quinasas activadas por mitógenos (ERK1/2-MAPK), cuya participación es fundamental en procesos inflamatorios. Los receptores activados por factores de proliferación peroxisomal γ (PPARγ) son factores de transcripción dependientes de ligando que han sido implicados en la regulación del metabolismo lipídico y de procesos inflamatorios. En este trabajo evaluamos el aporte de 15-deoxi-Δ12,14-prostaglandina J2 (15dPGJ2), ligando natural de PPARγ y de la citoquina antiinflamatoria IL-10 en la resolución de la respuesta inflamatoria en cultivos primarios de miocardiocitos neonatales de ratón infectados con la cepa letal pantrópica/reticulotrópica (RA) de T. cruzi. Los resultados de esta evaluación evidencian que 15dPGJ2 es capaz de inhibir la expresión y actividad de diferentes enzimas inflamatorias como NOS2, MMP-9 y MMP-2, así como la expresión de las citoquinas proinflamatorias TNF-α e IL-6 inducidas por la infección. Los efectos inhibitorios ejercidos por 15dPGJ2 involucran participación de mecanismos dependientes e independientes de PPARγ. La contribución de su receptor en los efectos ejercidos por 15dPGJ2 fue confirmada al silenciar la expresión mediante ARN de interferencia (siARN-PPARγ). Por otro lado, a partir de la utilización de inhibidores específicos de ERK1/2 y de NF-ĸB, demostramos que 15dPGJ2 también ejerce sus efectos de manera independiente a PPARγ, a través de estas vías. IL-10 es una de las principales citoquinas antiinflamatorias y fue identificada originalmente como un factor inhibidor de la síntesis de citoquinas proinflamatorias y modulador de ciertas funciones asociadas a la activación de macrófagos y/o monocitos. En este trabajo se describe que la adición de IL-10 exógena inhibe la activación de las vías de señalización de ERK1/2 y de NF-ĸB y reduce los niveles de expresión y actividad de NOS2, MMP-9 y MMP-2, así como la expresión de TNF-α e IL-6 inducidas por la infección. La señalización por IL-10 a través de su receptor promueve fosforilación de STAT3, el cual actúa como factor de transcripción induciendo la expresión de proteínas supresoras de la señalización por citoquinas-3 (SOCS-3). Tanto la infección con T. cruzi como IL-10 inducen fosforilación de STAT3 y la expresión del ARNm de SOCS-3. El silenciamiento de la expresión de esta proteína mediante ARN de interferencia (siARNSOCS- 3) pone en evidencia la participación de la vía STAT3/SOCS-3 en los efectos ejercidos por IL-10. El conocimiento más profundo sobre el papel de ligandos de PPARγ y de IL-10 podría ser de gran utilidad para formular estrategias alternativas o coadyuvantes de la terapéutica clásica en la infección por T. cruzi.

El presente trabajo de tesis plantea la realización de experimentos idealizados de asimilación de datos basado en un Filtro de Kalman por ensambles (EnKF) sobre un dominio regional centrado en Sudamérica. En particular se emplea el algoritmo conocido como Local Ensemble Transform Kalman Filter (LETKF) acoplado al modelo numérico Weather Research and Forecasting (WRF). Los experimentos exploran la sensibilidad del sistema de asimilación frente a los errores de modelo y los errores presentes en las condiciones de borde lateral. Los resultados indican que las regiones tropicales son más sensibles a los errores de modelo, mientras que las latitudes medias están más directamente influenciadas por los errores en las condiciones de borde lateral. Para reducir los errores del análisis se evalúan diferentes metodologías que buscan representar de manera explícita los errores en el sistema de asimilación: la inflación multiplicativa adaptativa estimada, los ensambles físicos y la introducción de perturbaciones en las condiciones de borde lateral. El empleo de dichas técnicas permite reducir el del error del análisis y contribuye a mejorar la representación de su incertidumbre. Sin embargo, los mejores resultados se obtienen al combinar dichas técnicas de forma simultánea. Finalmente, se llevan adelante experimentos utilizando observaciones reales en los que se explora el impacto de la resolución del modelo en la calidad del análisis y de los pronósticos a corto plazo. En estos experimentos se encuentra que el aumento de la resolución del modelo numérico genera una mejora tanto de la calidad del análisis como del pronóstico resultante. Sin embargo, los resultados sugieren que un tratamiento adecuado de las diferentes fuentes de incertidumbre que afectan a un sistema de análisis - pronóstico regional, junto con la incorporación de una mayor cantidad de observaciones, podría producir un impacto mayor sobre la calidad del análisis.

La exposición prenatal a estímulos pro-inflamatorios influye sobre diversas funciones del cerebro adulto. Además, estímulos pro-inflamatorios han mostrado efectos adversos sobre la neurogénesis adulta. En base a estos antecedentes, nuestra hipótesis de trabajo fue que un estímulo pro-inflamatorio durante el período prenatal provoca una disminución permanente de la neurogénesis adulta. Para testar esta hipótesis, ratas Wistar preñadas recibieron inyecciones subcutáneas de un estímulo pro-inflamatorio, el lipopolisacárido bacteriano (LPS), en sus días 14, 16, 18 y 20 de gestación. Las crías adultas prenatalmente tratadas con LPS mostraron una reducción en la cantidad total de células en proliferación y en la diferenciación neuronal en el giro dentado, que resultan en una menor neurogénesis total. Sin embargo la proliferación de progenitores neurales y la supervivencia celular se mantuvieron constantes. Además, el tratamiento prenatal con LPS provocó alteraciones en el desempeño de los animales en el test comportamental de Reconocimiento del Objeto Nuevo, un test que evalúa la memoria a corto plazo, y que ha sido previamente relacionado con la neurogénesis adulta. Evaluando cambios a nivel sistémico que expliquen la disminución de la neurogénesis adulta por el LPS prenatal, observamos que la exposición prenatal a LPS no afectó el funcionamiento basal del eje neuroendócrino Hipotalámico-Hipofisario-Adrenal. Por otra parte, el LPS administrado a las hembras en su preñez sí afectó los niveles de cuidado materno de las crías. Sin embargo, experimentos de adopción cruzada demostraron que los efectos del LPS prenatal sobre la neurogénesis adulta fueron independientes del cuidado materno recibido por las crías. El tratamiento prenatal con LPS provocó alteraciones permanentes en la composición del entorno o nicho neurogénico del GD adulto: a nivel celular, se observó una activación morfológica permanente de la microglía a estadíos intermedios. A nivel molecular, se observaron alteraciones agudas en la expresión de citoquinas en el cerebro fetal y una expresión disminuida del Factor Transformante de Crecimiento beta 1 (TGF-β1) específicamente en el GD de animales adultos. La sobreexpresión crónica de TGF-β1 en el GD adulto restauró los niveles disminuidos de neurogénesis a los niveles originales, equivalentes al grupo control, mientras que no aumentaron los niveles de neurogenesis en el grupo control. Además, la sobreexpresión bilateral de TGF-β1 restauró el desempeño en el test de Reconocimiento del Objeto Nuevo a los niveles del grupo control. La exposición adulta a LPS, al contrario de la exposición prenatal, provocó efectos transientes en la disminución de neurogénesis y la activación de microglía. Por otra parte, TGF-β1 mostró efectos pro-neurogénicos in vitro a través de la activación de su principal vía de señalización, la vía Smad 2/3. Estos resultados validan la hipótesis de trabajo. Además, destacan el período prenatal con una etapa de susceptibilidad a estímulos inflamatorios que ejercerán efectos a largo plazo sobre la neurogénesis adulta y comportamientos relacionados a través de alteraciones permanentes en la composición del nicho neurogénico, como la activación microglíal y la expresión disminuida de TGF-β1 en el GD. Por su parte, TGF-β1 resulta un modulador central de la disminución de los niveles de neurogénesis adulta y de comportamientos asociados a memoria por el LPS prenatal

La ghrelina es una hormona peptídica secretada por células especializadas del estómago y que actúa principalmente en el cerebro. La ghrelina regula una amplia variedad de procesos, entre los que se pueden mencionar la secreción de hormona de crecimiento, la homeostasis de glucosa, la actividad de ejes neuroendócrinos, el peso corporal y la motilidad gastrointestinal, entre otros. La característica que destaca a la ghrelina es que es la única hormona conocida por estimular el apetito, haciéndolo a través de la regulación de distintos circuitos neuronales que modulan diferentes aspectos del consumo de alimentos. La función moduladora más estudiada de la ghrelina es la capacidad de regular la ingesta de alimento de acuerdo a las necesidades energéticas del organismo. Sin embargo, la ghrelina también es capaz de regular, actuando a nivel central, el vaciado y la motilidad gastrointestinal y el consumo de ciertos tipos de alimentos de acuerdo al valor de recompensa que genera la ingesta de los mismos. Estos efectos de la ghrelina se dan por acción de la hormona sobre núcleos cerebrales situados en el tallo encefálico. Sin embargo, no se conoce con claridad la base neuroanatómica y funcional que subyace a los efectos de la ghrelina sobre estos núcleos cerebrales. Esclarecer los mecanismos a través de la cuales la ghrelina actúa resulta de gran interés debido a las implicancias que poseen en el mantenimiento de la homeostasis energética. Así, el objetivo general de este trabajo de Tesis fue estudiar el rol modulador de la ghrelina sobre los circuitos neuronales del tallo encefálico y determinar si la presencia del receptor de ghrelina en ellos modula procesos relacionados a la ingesta de alimentos.

La ghrelina es una hormona peptídica secretada por células especializadas del estómago y que actúa principalmente en el cerebro. La ghrelina regula una amplia variedad de procesos, entre los que se pueden mencionar la secreción de hormona de crecimiento, la homeostasis de glucosa, la actividad de ejes neuroendócrinos, el peso corporal y la motilidad gastrointestinal, entre otros. La característica que destaca a la ghrelina es que es la única hormona conocida por estimular el apetito, haciéndolo a través de la regulación de distintos circuitos neuronales que modulan diferentes aspectos del consumo de alimentos. La función moduladora más estudiada de la ghrelina es la capacidad de regular la ingesta de alimento de acuerdo a las necesidades energéticas del organismo. Sin embargo, la ghrelina también es capaz de regular, actuando a nivel central, el vaciado y la motilidad gastrointestinal y el consumo de ciertos tipos de alimentos de acuerdo al valor de recompensa que genera la ingesta de los mismos. Estos efectos de la ghrelina se dan por acción de la hormona sobre núcleos cerebrales situados en el tallo encefálico. Sin embargo, no se conoce con claridad la base neuroanatómica y funcional que subyace a los efectos de la ghrelina sobre estos núcleos cerebrales. Esclarecer los mecanismos a través de la cuales la ghrelina actúa resulta de gran interés debido a las implicancias que poseen en el mantenimiento de la homeostasis energética. Así, el objetivo general de este trabajo de Tesis fue estudiar el rol modulador de la ghrelina sobre los circuitos neuronales del tallo encefálico y determinar si la presencia del receptor de ghrelina en ellos modula procesos relacionados a la ingesta de alimentos.

En esta tesis se estudian las características más sobresalientes de la circulación general de la atmósfera en el hemisferio sur en la que hace a la dinámica de los efectos orográficos, particularizando en los fenómenos de naturaleza marcadamente barotrópica por un lado y marcadamente baroclínica por el otro. Para ello se desarrolla un modelo barotrópico con el esquema de Arakawa y Lamb, el cual tiene la capacidad de conservar la energía total y la enstrofía potencial del sistema y es estable aún en presencia de pendientes abruptas del terreno . El objeto de desarrallar este madelo es estudiar el efecto dinámico de la Cordillera de los Andes en dos fenómenos de estructura marcadamente barotrópica: las ondas estacianarias y los anticiclones de bloqueo. Se modifica también un madelo baroclínico en ecuaciones primitivas y coordenadas esféricas con la coordenada σ en la vertical: se ha extendido el recinto de integración a un hemisferio, incluyéndosele un filtro de Fourier para las altas latitudes, se le han modificado las condiciones de borde y se le ha incorporado la difusión horizontal y vertical. En este modelo, de 5 niveles en la vertical, se ha incorporado a la topografía como regiones de aire estanco y es empleado para la simulación de desarrollos ciclogenéticos. Las experiencias realizadas con estos modelos muestran que para lograr una correcta representación de los fenómenos es necesario emplear una orografía realzada (conocida como "envelope orography"). Las simulaciones de las ondas estacionarias indican que la orografía produce campos semejantes a los observados al sur de 45º S para invierno y al sur de 35º S para verano. Esta comparación es desde el punto de vista espectral. Regionalmente, los campos simulados coinciden cualitativamente con los observados entre 110/120º O y 10º E y al norte de 70º S para ambas estaciones, aunque la coincidencia es más pronunciada para el verano. De todos los continentes, América del Sur (con la cordillera de los Andes) es el más importante para definir la configuración de los campos simulados. La Antártida, entre 50 y 70º S también hace un aporte a las ondas. Las simulacianes de bloqueos muastran que el mecanismo de Kalnay-Rivas y Merkine (1981) mantiene su validez al ser extendido a un hemisferio con geometría esférica y con una topografía realiata. Este mecanismo, más que la iniciación del bloqueo, explicaría su intensificación y mantenimiento. La ciclogénesis a sotavento de los Andes resulta más profunda y más al norte que en el caso de ausencia de orografía. La orografía tendría el efecto de aumentar principalmente la acción ciclogenética del término de la advección de espesores en la ecuación del desarrollo, debido al bloqueo del flujo en las capas bajas.

Se ha mostrado que la solución de la ecuación de colisión de Boltzmann para una mezcla binaria muy diluida, cuando la función de distribución del componente más concentrado está prefijada, puede hacerse por un método enteramente análogo al de Enskog. Como consecuencia de las condiciones del problema, se puede fijar solamente un parámetro arbitrario: la densidad de neutrones en cada elemento de volumen, y se puede obtener por el método de los invariantes de colisión, solamente una ecuación de conservación: la del número de neutrones. Se han aplicado estos resultados al caso de neutrones térmicos en un moderador, fijando convenientemente la función de distribución de los núcleos y considerando a estos y a los neutrones como esferas rígidas. Se ha obtenido de este modo la ley de difusión de neutrones corregida por los efectos de gradientes de temperatura; este efecto tiene el mismo origen que la difusión térmica. Se han hecho algunas aplicaciones numéricas en casos de interés práctico, o de realización experimental posible, para gradientes térmicos del orden de diez grados por centímetro. Se han calculado en esos casos variaciones del flujo escalar de neutrones de 2 a 3% o de 3 a 10% respectivamente, respecto a los mismos fenómenos con gradientes térmicos nulos. Resulta de todo esto, que la corrección a la ley de difusión por gradientes de temperatura, puede ser de interés para el caso de neutrones térmicos en medios dispersores, con variaciones de temperatura que se presentan habitualmente.

La producción del chocolate consta de etapas bien definidas. Durante las primeras, el chocolate es un fluido y se lo prepara para convertirlo controladamente en un sólido. El elemento central de este comportamiento es su fase continua grasa: la manteca de cacao (MC). En ella se dispersan sólidos (azúcar y sólidos de cacao) para formar una suspensión que es y debe mantenerse libre de agua; que debe ser fisicoquímicamente favorecida en su preparación; y que luego debe ser estabilizada. En todos estos aspectos juegan un rol fundamental los emulsionantes. En este estudio, se evaluaron moléculas poliméricas con potencial capacidad emulsionante como mejoradoras del comportamiento de flujo de la masa de chocolate fluido, pero que a la vez no entorpezcan la etapa de cristalización polimórfica en su transición líquido-sólido. Ambos aspectos son indisolubles para la obtención de un chocolate con buenos atributos organolépticos y buena resistencia al “fat bloom” como principal e inevitable parámetro de deterioro. Entre los productos evaluados, el copolímero de injerto etilcelulosa (EC) fue el más eficiente, vehiculizado por disolución en una mezcla de triglicéridos de cadena media (TCM). Considerando la complejidad de la matriz chocolate, donde la ausencia de agua constituye quizás la dificultad más grande para su estudio, se recurrió al diseño de emulsiones no acuosas de propilenglicol en aceite para describir los mecanismos fisicoquímicos involucrados en la acción emulsionante de la mezcla EC-TCM. La estabilización exitosa de estas emulsiones permitió postular un modelo de acción posible para la suspensión chocolate, basado en la muy buena actividad de superficie de la EC. Esta condición de anhidro del chocolate fue aprovechada para vehiculizar principios activos poco solubles en agua. En esta tesis se demostró que la manteca de cacao no sólo es un buen solvente para estas drogas, sino también que su transición líquido-sólido sirvió para el diseño de dos formulaciones terapéuticas: un antiparasitario de uso humano y animal (mebendazol), y un regulador estral porcino (altrenogest). Además de la obtención de formulados homogéneos, estudios de estabilidad demostraron que la matriz chocolate no afecta el polimorfismo del mebendazol, y protege al altrenogest de su fotosensibilidad.

En el presente trabajo de tesis se estudian mediante el método IPPP-CHF(UCHF)-INDD-GIAD los efectos espaciales de anisotropia magnética y decampo eléctrico sobre el tensor de apantallamiento magnético protónico en propenos sustituidos, 1-naftaldehído, naftalenos monosustituidos en general y bencenos monosustituidos. Para el 1-naftaldehído se realiza, además, un estudio CLOPPA para identificar los orbitales moleculares que dan lugar a elementos de matriz elevantes en el tratamiento perturbativa. Esto permite ponderar la "importancia" de un determinado fragmento ó subfragmento molecular. En este orden de cosas, se analizan y comparan los efectos de sustituyentes "peri" y "orto", y se muestra su naturaleza electrónica diferente tanto para el apantallamiento magnético protónico como para el de F19 (Cap. 5). Se hace extensivo el estudio de los efectos espaciales sobre el tensor de apantallamiento magnético del flúor a naftalenos monosustituidos. A partir del mismo se muestra la importancia de una elección cuidadosa de los fragmentos moleculares y el uso imprescindible de la técnica perturbativa CHF (Coupled Hartree-Fock) en lugar de la UCHF (Uncoupled Hartree-Fock) (Capítulo 5). En el Capitulo 3 se desarrollan las ecuaciones necesarias para la obtención de susceptibilidades magnéticas "locales" de fragmentos moleculares, y en el Capitulo 5 se estudia su invariancia al trasladarlos de una molécula a otra, asi como su variación con diferentes entornos electrónicos. Se desarrollan además dos métodos diferentes para el estudio del campo eléctrico intramolecular producido por un determinado sustituyente molecular (Capitulo 4). Por un lado, se aplica un método de Orbitales Moleculares Localizados, y por otro lado, un métodode integración numérica de la densidad electrónica para obtener el campo eléctrico via la Ley de Coulomb. Los resultados obtenidos se discuten en el Capitulo 5. Por último, se desarrollan las ecuaciones para el cálculo de la susceptibilidad magnética y el tensor de apantallamiento magnético en el Gaugede Landau (Capitulo b). Los resultados ab-initio obtenidos para la molécula de agua se comparan con cálculos en el usual gauge de Coulomb y con datos experimentales