Catálogo de publicaciones

En esta Tesis Doctoral se presenta un estudio en gran escala de propiedades fotométricas de la población de galaxias del Cúmulo de Antlia. En el mismo, se incluyen galaxias de tipo temprano, desde elípticas gigantes hasta enanas elípticas y esferoidales, incluyendo zonas periféricas, aledañas a la parte central del cúmulo, no analizadas hasta la fecha. Este trabajo involucra aproximadamente 180 galaxias, entre las cuales se encuentran las ya catalogadas previamente sobre placas fotográficas por Ferguson y Sandage (1990) sumadas a 77 nuevas galaxias descubiertas. El material observacional que se utilizó en este trabajo consiste en imágenes CCD de 4 campos del cúmulo de Antlia, incluyendo entre ellos la zona central. Las imágenes han sido obtenidas con el telescopio Víctor Blanco de 4−m del Observatorio Interamericano de Cerro Tololo (CTIO-Chile), con la cámara MOSAICII de 8 CCDs y los filtros R de Kron-Cousins y C del sistema de Washington. Cada imagen tipo mosaico cubre un área proyectada sobre el plano del cielo de 36' ×36', con lo que la cobertura total del cúmulo es aproximadamente de 1.5 grados cuadrados. Se ha realizado fotometría superficial para cada objeto en forma individual. Se obtuvieron los perfiles de brillo superficial mediante la tarea ellipse del paquete IRAF y se realizaron ajustes a tales perfiles, utilizando un modelo de Sérsic, mediante la tarea nfit1d. Los perfiles teóricos se integraron numéricamente hasta infinito para calcular magnitudes totales. De este modo, para cada galaxia se obtuvieron magnitudes y colores integrados, brillos superficiales, radios efectivos, índices de Sérsic, y demás parámetros estructurales. Posteriormente, se analizaron las correlaciones entre tales parámetros galácticos que caracterizan los diferentes tipos y/o morfologías presentes en el entorno de un cúmulo de galaxias. Se estudió la relación color-magnitud de las galaxias de tipo temprano, que se encuentra en buen acuerdo con relaciones análogas para otros cúmulos, y muestra un suave quiebre en la parte brillante, que se explica mediante resultados de modelos. Se construyeron relaciones de escala estructurales y fotométricas entre las magnitudes totales integradas, los brillos superficiales central, efectivo y efectivo promedio, el radio efectivo, etc., las que además se han comparado con otros cúmulos de galaxias. Se encuentra un buen acuerdo global, principalmente en la zona de bajo brillo superficial. Finalmente, se analizaron tales relaciones de escala a fin de determinar si están presentes distintas secuencias para distinto tipo de galaxias tempranas, mostrando separaciones o dicotomías, o si es posible representar distintos tipos de galaxias tempranas con correlaciones únicas. En función de estas opciones, e incluyendo los datos de otros grupos y cúmulos, resulta factible interpretar el origen y/o evolución de las galaxias de tipo temprano, brillantes y enanas, a partir de procesos diferentes, dado que los ajustes realizados mediante dos secuencias diferentes para cada subpoblación parecen ser los más apropiados.

The aim of this work was to study the influence of glycosylation (or Maillard Reaction) on structural characteristics and gelling capacity of whey proteins (WPI) and dextran (DX) systems. Gelation and mechanical properties of WPI/DX mixed gels (without Maillard reaction) were compared to glycosylated systems. The influence of reaction time and dextran molecular weight were evaluated. A further progress of the Maillard reaction with increasing DX concentration and reaction time but decreasing molecular weight, was observed. Maillard reaction greatly affected gelation time and temperature of the WPI/DX systems. The uniaxial compression test revealed two different behavior between glycosylated and mixed systems, since glycosyltaed gels did not present fracture under this test. Mechanical parameters of mixed gels revealed that the higher the DX concentration and the higher molecular weight, the greater the fracture strain (kPa), while the Hencky´s strain remains unaltered. Fracture parameters for glycosylated gels were not obtained, but Young's modulus was acquired. This parameter could reveal that glycosylated gels were much weaker than mixed gels. These results show that it is possible to obtain systems with totally different gelling properties, applying a reaction that occurs spontaneously in proper conditions and it is safe.

In order to identify members of the bZIPs family of proteins in Trypanosoma cruzi, gel shifts experiments were done using oligonucleotides with AP-l sequences. Using a double stranded probe, three specific complexes were formed, named A, B and C. When using a single stranded probe, only complexes A and C were obtained. The relative amount of the complex B (double stranded), increased as a function of length probe and ionic strength. UVC cross-linking generated 100, 60 and 39 kDa bands for complex A, 46 and 43 kDa bands for complex B and just one band of 43 kDa for complex C. The partial purification of the proteins confirmed the common nature of complexes B and C. A new gene from T. cruzi belonging to the CCHC zinc finger proteins family was cloned by PCR. The new protein contains seven zinc finger domains and was named poly zinc finger protein, PZFP-1. Southern blots experiments showed that the gene is arrayed in tandem copies. Northern and Western blots assays showed a strong expression in epimastigote forms. The new protein forms strong dimers and could bind to single stranded CCHC binding sites. Inmunofluorescence assays showed that the protein is mainly citoplasmatic, but is also present in discrete regions of the nucleous. Fractioning of epimastigote extracts showed that both AP-1 and CCHC DNA-binding activities, copurify, and that PZFP-1 could be involved in the formation of the complex B.

Xanthomonas axonopodis pv. citri (Xac) es el agente causal de la cancrosis de los cítricos, que afecta al género Citrus en todo el mundo. Debido a la ausencia de patovares resistentes a la enfermedad y la falta de mecanismo efectivos de control y erradicación, resulta interesante estudiar los mecanismos moleculares responsables de esta interacción planta-patógeno compatible. Entre los mecanismos de patogenicidad de Xac, el estudio de las proteínas efectoras y el rol que cumplen en la célula hospedadora, así como el estudio del regulador HrpG del SSTT son objeto de estudio en el presente trabajo de tesis. Estudios previos realizados en el laboratorio iniciaron la caracterización de las proteínas efectoras AvrXacE1, AvrXacE2, y Xac3090 de Xac, mediante ensayos de interacción con proteínas de Citrus sinensis en un sistema de doble híbrido en levaduras; y la construcción de cepas mutantes en dichas proteínas. En este trabajo de tesis se profundizó la caracterización de estos efectores de Xac construyendo una cepa doble mutante en los genes avrXacE1 y avrXacE2 y complementando las cepas mutantes construidas anteriormente.

La Citocromo c Oxidasa (CcO) es el complejo final de la cadena de transporte de electrones mitocondrial. COX10 está implicada en la biosíntesis del grupo hemo a, mientras que las proteínas del tipo Sco (HCC1 y HCC2) están involucradas en el tráfico e inserción de cobre en la CcO. Al estudiar plantas mutantes en COX10, se pudo observar que la proteína resulta esencial para el desarrollo de la semilla de Arabidopsis thaliana, además una reducción de su expresión, genera una disminución de la actividad CcO que impacta en la progresión de la senescencia. Al estudiar las proteínas del tipo Sco se observó que el perfil de transcripción global de plantas mutantes en HCC2 (hcc2) y plantas antisentido para HCC1 (asHCC1) presentaba una regulación opuesta en numerosos grupos de genes, principalmente de respuesta a estrés. En concordancia con esto, las plantas hcc2 fueron más tolerantes al estrés por NaCl mientras que las asHCC1 fueron más sensibles. Así mismo, estas plantas presentaron una respuesta transcripcional y fisiológica diferencial al NaCl, lo que concluye con una caída temprana en el ensamblado de la CcO así como en su actividad y respiración. Además, ensayos de BiFC indican que ambas proteínas son capaces de interaccionar in planta. Estos resultados sugieren que las proteínas HCC tendrían roles opuestos en la modulación de la respuesta a estrés y que la interacción entre ambas proteínas podría modular las propiedades redox de HCC1 y posiblemente su función en el ensamblado de la CcO y/o en la respuesta a estrés.

Los cestodos del género Echinococcus, en particular su estadio larval o metacestodo, son los agentes patógenos responsables de las enfermedades denominadas hidatidosis o echinococcosis, de importancia tanto en la salud humana como de animales domésticos. Las especies más representativas, por su amplia distribución geográfica y el impacto que representan en la economía y la salud pública, son E. granulosus y E. multilocularis. La Organización Mundial de la Salud ha incluido a estas enfermedades dentro de un grupo prioritario de enfermedades tropicales desatendidas. Estos cestodos, al igual que muchos otros platelmintos parásitos, son incapaces de sintetizar la gran mayoría de sus lípidos de novo, por lo que deben adquirirlos a partir de sus hospedadores. En ese contexto, se cree que las proteínas que unen ácidos grasos (FABPs) podrían tener un rol importante en la adquisición de dichos nutrientes y la distribución de los mismos entre los diferentes tejidos, estadios y/o vías metabólicas de estos cestodos. Hasta el momento, sólo una FABP de E. granulosus, denominada EgFABP1, ha sido parcialmente caracterizada. Sin embargo, para poder determinar si esta proteína participa en el transporte e intercambio de lípidos, es necesario avanzar en el análisis de los ligandos que EgFABP1 es capaz de unir y en su capacidad de intercambiar estos ligandos. Para ello, en la presente tesis se aplicaron diversas técnicas biofísicas y bioquímicas para la caracterización de la interacción de EgFABP1 con ligandos y membranas fosfolipídicas. Mediante análisis por cromatografía en capa fina y cromatografía gas-líquido de los lípidos que copurifican con EgFABP1 recombinante expresada en Escherichia coli, se logró determinar que en un ambiente celular complejo, como es el citoplasma de una bacteria, EgFABP1 sólo uniría ácidos grasos libres y no lípidos más complejos, como por ejemplo, fosfolípidos. Asimismo, mediante técnicas de proteólisis parcial y dicroísmo circular se estableció que la unión de EgFABP1 a ligandos es capaz de inducir diferentes cambios conformacionales en la proteína, dependiendo del tipo de ácido graso al que se una. Por otro lado, el estudio de los mecanismos de transferencia de ácidos grasos fluorescentes a membranas fosfolipídicas artificiales mostró que EgFABP1 emplearía un mecanismo de transferencia de tipo colisional, lo cual implica que la proteína debe interactuar con la membrana para entregar sus ligandos. Esto es similar a lo observado para FABPs de mamíferos, ampliamente estudiadas, que se asemejan a EgFABP1 tanto a nivel de secuencia como de estructura terciaria, lo que puede facilitar el enfoque de futuros estudios sobre esta proteína de E. granulosus. Por otra parte, la exploración de los genomas de E. granulosus y E. multilocularis recientemente publicados, permitió establecer la existencia de un total de seis genes de FABPs en cada una de las dos especies, destacándose en el caso de E. multilocularis el hecho de que dos de esos genes codifican para una misma proteína. En el presente trabajo, se clonaron las cinco secuencias codificantes de E. multilocularis, por lo que se pudo establecer experimentalmente parte de la estructura génica de dichos genes. Asimismo, ensayos preliminares sugieren que estas FABPs se expresan diferencialmente en distintos tejidos del parásito. Por otro lado, se realizó una caracterización bioinformática de los genes y proteínas FABPs predichos en ambos cestodos, comparándolos con información existente sobre proteínas de esta familia en otros organismos. En conjunto, los resultados obtenidos en esta tesis amplían el conocimiento relativo a las FABPs de Echinococcus spp., revelando la existencia de toda una familia de FABPs que podrían cumplir roles específicos en diferentes tejidos y/o estadios de estos parásitos. A diferencia de lo que se creía previamente, esto plantea un panorama bastante más complejo en el transporte y metabolismo de ácidos grasos, y posiblemente otros ligandos hidrofóbicos, en parásitos cestodos. Asimismo, la capacidad de EgFABP1 de interactuar con membranas y transferir ácidos grasos podría implicar su relación con el transporte y derivación de ligandos hacia diferentes compartimentos y/o vías metabólicas en las células de E. granulosus. Los cambios conformacionales inducidos por ciertos ligandos, podrían tener implicancias desde el punto de vista de la señalización y regulación génica, análogamente a lo descripto para otras FABPs.

Los lípidos son compuestos que cumplen una gran variedad de funciones en la biología celular, desde componentes estructurales o nutrientes de reserva hasta señales hormonales o incluso feromonas pasando por moduladores de la transcripción y pigmentos fotosintéticos. Sin embargo, por definición, estos compuestos poseen una muy baja solubilidad en el medio acuoso celular. Por tal motivo, se cree que han evolucionado diferentes familias de proteínas solubles, capaces de unir lípidos en forma reversible en el citosol, las SLBP (Soluble Lipid Binding Proteins) intracelulares. Dentro de este conjunto de proteínas, las familias mejor caracterizadas corresponden a las proteínas que unen ácidos grasos (FABP) y las proteínas transportadoras de esteroles (SCP-2), ambas con capacidad de unir ácidos grasos de cadena larga. Cada familia de proteínas SLBP posee varias isoformas que presentan un patrón de expresión y especificidad de unión de ligando hidrofóbicos únicos. Se cree que estas diferencias residen en una baja identidad de secuencia (tan sólo un 20%), a pesar de la cual adoptan estructuras tridimensionales prácticamente superponibles. A fin de contribuir en la identificación determinantes estructurales críticos y las funciones específicas de las SLBP se estudiaron tres proteínas modelo que participan de tipos celulares que muestran una capacidad de metabolismo lipídico extraordinario, como son las células de enterocito intestinal de mamífero y las levaduras Yarrowia lipolytica. En el primer caso se coexpresan dos FABP en niveles prácticamente equivalentes. Por un lado se analizó in vitro el rol de residuos de Lys específicos de la IFABP en la transferencia de ácidos grasos, siendo estos importantes para el sensado de las características de las membranas aceptoras. Ensayos de interacción con membrana revelaron que tanto IFABP como LFABP muestran moduladores distintos de su interacción con bicapas fosfolipídicas, y que en particular las regiones α-helicoidal serían críticas para este fenómeno. Asimismo, se demostró la transferencia in vitro de ligandos entre ambas FABP intestinales. Finalmente, se comprobó que la expresión de LFABP en células Caco-2 en cultivo afecta la asimilación de ácidos grasos, así como su distribución a tiempos cortos. El análisis comparativo de estas proteínas parece indicar que cumplirían funciones diferentes dentro del entorno celular. En el caso de Y. lipolytica, sólo una SLBP es expresada con capacidad de unir ácidos grasos libres, representante de la familia de las SCP-2, YLSCP2. El análisis in vitro de sus capacidades de unión y de transferencia de ligandos hacia membranas aceptoras en distintas condiciones demostró que la YLSCP2 podría cumplir un rol de transporte de ligando hidrofóbicos hacia estructuras intracelulares específicas. En conclusión, estas proteínas no sólo son capaces de actuar como buffer citosólico de lípidos aumentando así su disponibilidad para los distintos procesos celulares, sino que también son capaces de modular o regular su metabolismo. Más estudios son necesarios para poder comprender mejor las funciones específicas de estas SLBP, pero los secretos que esconden sus estructuras podrían tener importantes aplicaciones en áreas diversas como medicina, nutrición, industria biotecnológica y el tratamiento de efluentes industriales.

El trabajo consta de tres partes, procedido de una introducción sobre los objetivos del mismo, en la que se destaca la necesidad de la aplicación de la electroforesis e inmunoelectroforesis en líquidos biológicos, particularmente en el estudio de las fracciones proteicas urinales. Parte I- Estudio electroforeticoe inmunoelectroforetico de las fracciones de las proteinurias. A) Consta de una introducción donde se mencionan los trabajos de diversos autores sobre las distintas fracciones de las proteinurias. B) Se describen las fracciones proteicas del plasma humano normal. C) Se hace una descripción del principio y de la técnica usada para el análisis electroforético e inmunoelectroforético de las proteinas urinarias en medio gelificado; la obtención del agar en medio tamponado; la preparación de las placas de agar sobre portaobjeto; el desarrollo electroforético; la precipitación específica; la fijación, lavado, desecado y coloración de las placas. Parte II- Valoración de protidos urinarios. D) Consta de una introducción donde se transcribe parte del artículo de Miatello N.R. sobre el examen de la orina con un cuadro sinóptico que resume las proteinurias más comunes. E) Se mencionan los métodos propuestos por varios autores para la valoración de los prótidos totales en orina: Método gravimétrico de Folin y Denis; método volumétrico de Esbach; método volumétrico de Shevaky-Stafford; método titrimétrico de Peters y Van Slyke; método colorimétrico de Hiller, Me Intosch y Van Slyke; método nefelométrico de Kingsbury y método de los patrones permanentes de perspex. Partes III- Parte experimental. F) Electroforesís e inmunoelectroforesis de proteínas urinarias. Se describio el material y los métodos utilizando para la aplicación de esta técnica. a) Se obtienen concentrados proteicos urinarios en 8 á 10 horas utilizando tubos de diálisis (Visking Dialysis Tubing 1/4° de diametro) brodeado de Polivinil Pirrolidona o Carbowax 20M. La concentración proteica obtenida es de 4 á 6 gramos por cien ml. de orina. b) Se preparan los portaobjetos de vidrios (7,8 por 2,8 cm.) cuidadosamente lavados; sobre los que se extienden 1 ml. de agar al 0,5% que se deja secar en estufa entre 80 y 90 °C.; esto permite que el agar tamponado se adhiera mejor a las placas. Agar tamponado: veronal sódico 9 g. ácido clorhídrico 0,1 N 65 ml. azida sódica 0,5 g. agua destilada hasta 1 litro. Para el uso se diluyen 50 ml. de buffer con 50 ml. de agua adicionados de 1,5 g. de agar purificado. Se vierten tres ml. de agar tamponado en cada portaobjeto y una vez frío se practican mediante un sacabocados, dos excavaciones en la masa de agar, colocados aproximadamente en la parte media entre los extremos anódico y catódico de la placa y en línea perpendicular a los bordes laterales. Luego se efectúa una incisión de 1 mm. en la parte media y a lo largo de la placa, paralelamente al sentido del desplazamiento electroforético, sin levantar el agar. c) Se procede al sembrado de la placa colocando en la excavación superior de 1 á 5 μl. de suero humano normal y en la inferior de 1 á 5 μl. de orina concentrada. d) Se efectúa el desarrollo electoforético: la solución tampón colocada en las cubetas es de ph. 8,2. Condiciones de trabajo: 4 ma,; 6 V. por cada portaobjetos; temperatura del laboratorio; tiempo de migración 3 á 4 horas. e) Se fijan las fracciones colocando las placas en ácido acético al 2% durante 3 ó 4 horas. Se desecan, recubriendo las placas con papel cromatográfico de grano fino y colocándolas en estufa a 37°C. 24 horas. f) Una vez practicada la electroforesis se procede a la siembra del antisuero en la incisión efectuada previamente al desarrollo electroforético. Se colocan las placas en cámara húmeda durante 12 horas, tiempo en que se produce el desarrollo de las reacciones antígeno-anticuerpo. Se sumergen las placas en solución fisiológica durante 3 días siguiendo la misma técnica que para la electroforesis simple. G) Interpretación de los resultados del análisis electroforético a inmunoelectroforético de concentrados proteicos urinarios. Se efectúa el fraccionamiento paralelo por electroforesis en placa de agar de las proteínas del suero humano normal y de los concentrados proteicos urinarios, observando identidad en el comportamiento electroforético (migran en posiciones idénticas). Se encuentran en la orina, la albúmina y las globulinas alfa, beta y gamma del suero, siendo la primera la más frecuente, siguiéndole la fracción beta y por último la gamma. El fraccionamiento inmunoelectroforético paralelo de las proteínas del suero y de los concentrados proteicos urinarios revelan la identidad inmunológica de las fracciones proteicas del suero y de la orina. Se visualizan por inmunoelectroforesis de los concentrados proteicos urinarios, fraccionamientos globulínicos que no se observan en el fraccionamiento electroforético, tal es el caso de la globulina gamma. Se acompaña veintinueve ampliaciones fotográficas de los resultados obtenidos sobre las placas de agar. H) Valoración de prótidos totales en orina. Ensayo comparativo de diversos métodos. Se comparan algunos métodos sencillos de valoración de prótidos urinarios con el método de Kjeldahl. Para ello se construyo un tubo de centrífuga especial, diseñado por Mc Kay. Se determinó por triplicado el contenido de proteínas de sueros humanos por el método de Kjeldahl, utilizando luego dicho suero para determinar el factor de cada uno de los tubos mencionados. Se consideró la cifra 7,3 como factor para los cuatro tubos usados. Se realizaron determinaciones comparativas de proteínas de diversas orinas con las siguientes técnicas: a) Método volumétrico de Shevsky-Stafford con el reactivo de Tsuchiya. b) Método volumétrico de Shevsky-Stafford con el reactivo de Esbach. c) Método volumétrico de Esbach con el tubo de Aufrecht. d) Método nefelométrico de la formazina. Se aconseja por su rapidez y exactitud el método de Shevsky-Stafford, con el reactivo de Tsuchiya, observando ciertas precauciones que los autores recomiendan. El método de la formazina si bien acusa resultados satisfactorios tiene el inconveniente de que los tubos testigos son de dificultosa preparación y de vida precaria. I) Estudio estadístico. Parte IV- Conslusiones y bibliografía.

La quitridiomicosis es una enfermedad emergente que en los últimos años ha sido vinculada a la muerte masiva de los anfibios. Esta enfermedad es causada por el hongo acuático zoospórico Batrachochytrium dendrobatidis -Bd- (Orden Rhyzophydiales). La infección de los anfibios comienza cuando las zoosporas móviles contactan un animal susceptible y penetran en su piel. Las alteraciones producidas por esta infección interfieren con varias funciones epiteliales de los anfibios como la circulación y mantenimiento del agua y sales, la respiración y el rol de este órgano como primer barrera contra muchas toxinas y agentes de infección. Hasta hace poco los hongos Rhyzophydiales sólo se conocían como parásitos de plantas, algas, protistas e invertebrados. La especie que afecta a los anfibios es de reciente descripción siendo el primer caso en el que un hongo quitridio afecta a vertebrados. La quitridiomicosis ha sido calificada como la peor enfermedad infecciosa entre los vertebrados registrada hasta el momento en términos de número de especies impactadas y la posibilidad de llevarlas a la extinción o al menos de diezmar poblaciones enteras. Teniendo en cuenta lo anteriormente expuesto, en este trabajo de tesis se plantearon los siguientes objetivos: • Evaluar la presencia de Bd en especies de anuros nativas de Argentina y analizar el significado de la infección en las diversas especies y regiones. • Discutir el papel de áreas protegidas en relación a la enfermedad. • Determinar la presencia de Bd en poblaciones de rana toro asilvestradas y de criadero en Argentina y discutir su implicancia en la conservación de especies nativas. • Elaborar mapas de predicción de nicho ecológico de Bd para Argentina. • Determinar las variables ambientales que influyen en la distribución de Bd en Argentina con el fin de analizar los sitios donde el hongo quitridio podría prosperar en relación a las características ambientales de los mismos. • Desarrollar y listar una serie de recomendaciones con el objetivo de minimizar la dispersión de Bd y mantener control sobre el transporte de especies.

Los rayos cósmicos son partículas que llegan a nuestro planeta desde el espacio exterior, con energías comprendidas entre 109 eV y 1020 eV, siendo los más energéticos un gran enigma, ya que no conocemos cuales son sus fuentes, su composición química ni cómo son acelerados. El Observatorio Pierre Auger (PAO) fue dise~nado y construido para estudiar los rayos cósmicos a energías mayores de 1018 eV. El mismo se encuentra en la zona de Pampa Amarilla, próximo a la ciudad de Malargüe, en la provincia de Mendoza. Su tamaño gigante de aproximadamente 3000 km2 y el concepto híbrido de detección, proporcionado por detectores de superficie y de fluorescencia atmosférica, confieren al PAO capacidad suficiente para evaluar el espectro de energía, direcciones de arribo y composición química de los rayos cósmicos. Estos observables son los más importantes y el PAO los mide con altísima resolución y una estadística sin precedentes, utilizando las lluvias atmosféricas extensas que estos generan cuando ingresan a la atmósfera. Para bajar la energía umbral de detección del PAO a valores de 1017 eV, distintas extensiones fueron elaboradas en los últimos años. Uno de estos proyectos es Auger Muons and Infill for the Ground Array (AMIGA), que reduce la energía de detección en una década respecto a la energía original del PAO, posibilitando estudios en la región del espectro donde se cree encontrar una transición en el origen de los rayos cósmicos desde fuentes galácticas a extra galácticas. AMIGA posee dos tipos de detectores: por un lado detectores de superficie con separación de 750 m, menor que la del PAO de 1500 m, generando una región más densa de detectores denominada infill. Por otro lado contadores de muones que funcionan con la técnica de centelleo, que comenzaron a instalarse junto al arreglo denso de detectores, con el objetivo de determinar la composición química de los rayos cósmicos a partir del contenido muónico de las lluvias. Esta tesis esta abocada al estudio de los detectores y la física que posibilita AMIGA. La primer parte de la tesis esta dedicada al estudio de los contadores de muones de AMIGA. Se presenta la caracterización del primer prototipo del contador, a partir de la cual se entendió el funcionamiento del contador en condiciones de laboratorio y en el campo. Estos resultados fueron de suma importancia para establecer los parámetros finales de diseño del contador. También se detallan las tareas realizadas en la etapa de construcción e instalación de los primeros contadores de muones, indicando los primeros resultados que fueron obtenidos por estos detectores. Posteriormente se estudió la respuesta de los detectores de superficie utilizando la configuración infill y la original del PAO. Esta tarea fue realizada utilizando los primeros datos registrados por el infill, junto a la previa modificación de la reconstrucción estándar de eventos de superficie para considerar el caso en que los detectores se encuentran ubicados a menor distancia. Se caracterizó el infill para comprender su funcionamiento dentro de la estructura del detector de superficie del PAO, estudiando sus incertezas y comparándolas con las del arreglo principal. Luego se modificó la cadena de reconstrucción de eventos para el detector de superficie del PAO de forma tal de reconstruir los eventos del infill con el programa oficial Auger Offline Software. Para esto se determinó la distancia óptima que minimiza las incertezas de la reconstrucción y se optimizó la función de distribución lateral que mejor ajusta las se~nales de las estaciones que participan en cada evento. Se determinó el ángulo de referencia y la curva de atenuación con el método del Constant Intensity Cut, a fin de establecer el mejor estimador para la energía de los eventos del infill. Luego se realizó la calibración en energía del infill utilizando los eventos híbridos que fueron registrados por el detector de fluorescencia. Finalmente utilizando esta reconstrucción se determinó el espectro de energía de los rayos cósmicos en la zona donde el arreglo tiene máxima eficiencia de detección (2 x 1017 eV) y se obtuvo un índice espectral, cuyo resultado es compatible con el proporcionado por el PAO y otros experimentos que exploran las mismas regiones de energía. Por otro lado no se observó la presencia de una segunda rodilla en la zona del espectro explorada. En la última parte de esta tesis se presenta un estudio detallado de las anisotropías a gran escala con el método East-West utilizando eventos del infill. En el rango de energías explorado, entre 1016 eV y 1019 eV, no se observó una señal significativa que indique anisotropías, sin embargo se encontró una constancia en la fase del primer armónico en ascensión recta que sugiere fuertemente una orientación del dipolo en la dirección del Centro Galáctico.