Catálogo de publicaciones

El objetivo del presente trabajo fue estudiar el catabolismo del alcaloide gramina en plantas de Hordeum vulgare (cebada). Dicho estudio implicó la síntesis de gramina marcada en distintas posiciones con isótopos de carbono e hidrógeno, y de otros compuestos indólicos relacionados, los cuales fueron utilizados en experiencias "in vivo" con plantas de cebada en desarrollo. Los productos sintetizados permitieron realizar un estudio detallado de los espectros de RMN-¹H y particularmente RMN-¹³C de indoles sustituidos. En esta tesis se desarrollaron los siguientes temas: 1. Introducción: donde se resumen las características que le confieren a ciertas moléculas el carácter de alcaloide; se describen las características de las plantas de cebada utilizadas, los alcaloides presentes en las mismas y en particular, la presencia de gramina y los estudios realizados por otros autores sobre su biosíntesis y catabolismo. Se mencionan además las propiedades biológicas de la gramina y se hace referencia a su posible función en el vegetal. 2. Síntesis de indoles isotópicamente marcados: Se describe la síntesis de los distintos trazadores, radiactivos o no, y de otros compuestos indólicos empleados en la elucidación del camino catabólico de gramins y en estudios espectroscópicos . Ellos fueron: gramina-α-14C , gramina-α-¹³C, gramina-2-14C, gramina-2-¹³C, gramina-6-²H, gramina-6-³H, indol-2-¹³C, indol-6-²H, indol-3-carboxaldehido-2-14C, indol-3-carboxaldehido-2-¹³C, indol-3-carboxaldehido-6-²H, ácido indol-3-carboxílico-2-14C, 3-(hidroximetil)-indol, 3-(aminometil)-indol, 3-(metilaminometil)-indol, 6-bromoindol, 6-bromogramina y 1-trimetilsililindol . En especial, se desarrolló una síntesis novedosa para la obtención de indoles marcados con deuterio o tritio en el anillo bencénico, la cual resultó superior en especificidad y rendimiento químico e isotópico, a las anteriormente conocidas. Se aclararon además algunas contradicciones halladas en la literatura sobre la aplicabilidad de modificaciones de la reacción de Madelung para la síntesis de indol isotópicamente marcado. 3. Experiencias con plantas de cebada:En este Capítulo se describen: a) Las condiciones utilizadas para el desarrollo de las plantas y el método de inoculación de trazadores en plantas de cebada intactas en desarrollo. b) Experiencias de degradación de gramina-α-14C donde se determinó la degradación del C-α a C02. c) Experiencias de degradación de gramina-2-14C, donde se determinó la degradación del C-2 a C02. d) Experiencias de degradación de gramina-α-¹³C y su seguimiento por RMN-¹³C e) Experiencias de competencia y captura utilizando gramina-α-14C y gramina-2-14C en conjunto con posibles catabolitos como indol-3-carboxaldehido, ácido indol-3-carboxílico o 3-(hidroximetil)-indol y triptofano, ácido N- formilantranílico o formiato, respectivamente. f) Experiencias de degradación de indol-3-carboxaldehido-2-14C y ácido indol-3-carboxílico-2-14C donde se determinó la reversibilidad de la conversión gramina indol- 3-carboxaldehido. g) Experiencias realizadas con tallos aislados de cebada. h) Experiencias de degradación de gramina-6-³H y de gramina-(6-³H, 2-14C), donde se determinó la degradación total del sistema aromático. En base a estos estudios se concluyó que el C-α de la cadena lateral de la gramina es degradado cuantitativamente a C02, mientras que el C-2 sería eliminado como formiato que en gran parte se oxidaría a C02 mientras el resto pasaría al reservorio de C-1 del organismo donde sería posteriormente metabolizado a una variedad de compuestos. Los pasos en esta degradación serían la desmetilación secuencial del grupo dimetilamino y transformación a indol-3-carboxaldehido a través de una transaminasa, siendo esta parte de la secuencia reversible y probablemente común con el proceso biosintético de la gramina. Posteriormente se produciría la oxidación irreversible a ácido indol-3-carboxílico, descarboxilación con pérdida de la cadena lateral y ruptura oxidativa del anillo pirrólico para dar ácido N-formilantranílico y finalmente ácido antranílico y formiato. Las experiencias com gramina-6-³H permitieron además determinar que el ácido antranílico intermediario era también rápidamente degradado oxidativamente, con eliminación del ³H de la posición 6 de la gramina como ³H2O. La reversibilidad de la conversión gramina indol-3-carboxaldehido es analizada desde el punto de vista de su implicancia en la biosíntesis de gramina, la cual no se encontraba completamente elucidada. 4. Andlisis espectroscópico: Los distintos compuestos indólicos sintetizados, y en particular la marcación con ²H y ¹³C, permitió estudiar exhaustivamente los espectros de RMN-¹H y RMN-¹³C de estos compuestos. En especial se reasignaron las resonancias de los carbonos 5 y 6 de indol y gramina y 4 y 6 de indol-3-carboxaldehido en sus espectros de RMN-¹³C, los cuales estaban mal asignados en literatura. Además, se determinaron los espectros de RMN-²H de los compuestos deuterados, los cuales permitieron también asignar inequívocamente las resonancias del H-6 en los espectros de RMN-¹H de los compuestos sintetizados. Se asignaron completamente los espectros de RMN-¹H de indol, indol-6-²H, 6-bromoindol , gramina-6-²H, 6-bromogramina e indol-3-carboxaldeido-6-²H. 5. Parte experimental: Se describe la parte experimental de la labor realizada, donde se detallan las síntesis realizadas, las técnicas extractivas, cromatográficas y espectroscópicas empleadas, las condiciones de crecimiento de las plantas y de adrninistración de trazadores .

Temas tratados: - Estudio y experiencias con el micro-electrodo de plata - Comportamiento del micro-electrodo de plata en soluciones de cloruros - Comportamiento del micro-electrodo de plata en soluciones de bromuros - Comportamiento del micro-electrodo de plata en soluciones de yoduros - Comportamiento del micro-electrodo de plata en soluciones de mezclas de halogenuros - Estudio de la conversión del BrAg en IAg - Estudio y experiencias con el micro-electrodo plano, de capa fina de mercurio - Comportamiento del micro-electrodo plano, de capa fina de mercurio en soluciones de plomo (II) - Comportamiento del micro-electrodo plano, de capa fina de mercurio en soluciones de plomo (II) - mercurio (II) -

La química de los hidratos de carbono se ha transformado en un significativo punto de unión entre la química orgánica, la química medicinal y la biología. Levoglucosenona es un carbohidrato generado de la pirólisis de material celulósico y constituye una unidad estructural enantioméricamente pura con un gran potencial para su transformación en diversos derivados quirales. En este trabajo de Tesis, se exploró la factibilidad de utilizar levoglucosenona como material de partida para la construcción del esqueleto carbonado de Herbarumin I, un potencial agente herbicida natural y en la síntesis de tioazúcares y sus posibles aplicaciones. En el Capítulo III se describen los avances alcanzados en la obtención del esqueleto carbonado de Herbarumin I lográndose datos relevantes sobre la reactividad de los precursores obtenidos y que han permitido plantear futuras pautas a tener en cuenta para su transformación química en la estructura carbonado deseado. En los Capítulos IV y V se presenta un estudio detallado de la reactividad de tioazúcares intermediarios y derivados oxiranos que han estimulado parte de este trabajo de investigación dado su interesante comportamiento químico observado y aportado datos al conocimiento científico de elevado interés teórico y experimental. Los resultados presentados en este trabajo aportan datos experimentales que amplian el campo de aplicación de tioazúcares en síntesis orgánica y en la obtención de compuestos enantioméricamente puros de alto valor agregado.

Fil:Galmarini, Oscar L.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

El presente trabajo consta de cuatro capítulos. El primero trata sobre la Evolución Histórica de la Industria del helado y la considera desde sus comienzos en Estados Unidos de Norteamérica país donde particularmente ha adquirido un desarrollo notable. En el mismo se detalla el uso de los helados en la guerra de la Independencia Norteamericana y su posterior explotación industrial realizada por Jacob Fussel a quién se considera fundador de la industria heladera. Estan reseñados además los principales equipos que fueron simentando y definiendo esta industria, los distintos congeladores, endurecedores y homogeinisadores son descriptos desde el punto de vista de su importancia en el desarrollo de esta industria. Se consignan además otros importantes adelantos en los métodos usados en la manufactura y distribución de los helados tales como: la introducción de novedades, mejoramiento en la calidad de estabilisante, aplicación del laboratorio del control químico, mejoramiento en los equipos de venta etc. Se trata también en éste capítulo la aparición del "Ice cream soda" creada por Fred Sanders con el objeto de evitar el agreado de la crema dulce que expendía a la que llamaba soda; y el papel desarrollado por los llamados cucuruchos en el expendio detallándose además su origen, composición y manufactura. Se detallan además los factores más importantes y responsables del crecimiento de la industria del helado en Estados Unidos entre los que se cuentan; el mejoramiento en la calidad, la apreciación del valor nutritivo mediante adecuado programa de propaganda, producción en gran escala etc. También se informa en este capítulo algunas reseñas sobre la evolución de la industria heladera en el país, aunque no desde el punto de vista histórico por carecerse de información adecuada sino ayudados por estadísticas de la división de estadística y sensos del Ministerio de Hacienda de la Nación, dichas estadísticas se exponen en gráficos adecuados. El capítulo dos versa sobre un estudio de los helados desde el punto de vista de su valor nutritivo y calórico. Se considerar muestras de heladerías pequeñas y de helados de grandes fábricas; se expone también el criterio de selecciones de la misma para las determinaciones. Se detallan las técnicas usadas en las distintas determinaciones tales como: la de Kjeldahl para proteínas; Munson-Walker para glúcidos; Röse, Gottlieb-Patrick para grasas; las de Asociation of Vitamin Chemists para vitaminas A, B, l, B2 y C; y las de humedad y cenizas por los métodos directos de evaporación y calsinación. Finalmente los resultados se consignan en un cuadro de valores en el cual se observa que entre los helados allí consignados tienen mayor valor nutritivo y calórico los helados procedentes de grandes fábricas, en virtud de que estas últimas fabrican cremas heladas con mayor contenido en grasas y productos lácteos. El capítulo tres está dedicado al estudio del efecto que sobre la cristalización de los helados poseen ciertas substancias de naturaleza coloiral y de origen vegetal llamadas estabilisantes. El propósito definido de éste capítulo es documental fotomicrográficamente dicho efecto. Se ha encarado el estudio según el siguiente orden: a) Una introducción en la que se señala el objetivo preciso de las determinaciones a realizarse a la vez que se indican las condiciones de experimentación y la selección de muestras para dichas pruebas. b) Propiedades que deben cumplir los estabilisantes tales como: la capacidad de absorver agua y estabilizar la emulsión antes de congelarse, también se indica los requisitos que debe exigirse de un estabilizante entre otros; el nó comunicar traza alguna de olor o gusto, ser de uso fácil y sensillo y no requerir equipos especial para su incorporación, resultar economicamente conveniente, impartir cualidades adecuadas de fusión al paladearlo, no producir variaciones en el color, acidez libre pH. c) Detalle del instrumental utilizados y características principales de los mismos. d) Se describe las características y funcionamiento de la platina refrigerada a nieve carbónica, aclarándose que el uso de cobre en su construcción obedece a la necesidad de una parte conductora del calor en la misma; y la de fibra a una parte aislante del calor; se incluye además plano de la misma en corte y planta y fotografías de sus principales accesorios. e) Se describe los inconvenientes que se presentaron principalmente el debido a la condensación de agua del ambiente sobre el preparado congelado restando visibilidad a las experiencias. Se describen también las soluciones ensayadas para obviar dichos inconvenientes; se detalla el uso de porta y cubreobjeto de mica, la técnica de recubrir con glicerina aporta y cubreobjeto comunes y finalmente la solución adecuada a dicho problema mediante el uso del portaobjeto con una pequeña cámara en la cara superior que llena de gliserina permite traba ar por inmersión. f) Composición de las muestras con las cuales se realizaron las experiencias con estabilizantes. Se detalla la composición del helado de crema a la vainilla y el de naranja indicándose que para el primero es adecuado 0,3% de estabilizante y siendo necesario 0,4% para el segundo en virtud de la mayor cantidad de agua libre y azúcar presente. Igualmente se indica la cantidad adecuada a usar de manucol y el porqué de dicho proceder. g) Preparación de las muestras con el agregado de estabilizante. Se indica la técnica de preparación de ambas muestras haciéndose una aclaración sobre la forma en que beneficia el adecuado agregado de estabilizante. h) Se detallan las propiedades de las materias primas usadas en la preparación de las mismas: leche sacarosa, yema de huevo, y jugo de naranja y ensayos preliminares con las platinas; se expone fotomicrografía tomadas en distintas condiciones y que sirvieron para poner a punto la platina y dar idea de los tiempos de exposición de la película; entre dichas fotos figuran las de las materias primas de las fórmulas de helados congeladas y sin congelar y que sirvieron para poder individualizar las mismas en los helados. A continuación de las mismas se expone las fotomicrografías de las muestras sin estabilizantes y luego en sucesión las propiedades principales de los mismos con las fotomicrografías del helado después de habérseles incorporados los distintos estabilizantes. Termina este trabajo con el capítulo cuatro en el que se reseña las conclusiones de las observaciones antes citadas debiendo notarse que es el alginato de sodio quién dió mejor resultado; se incluye en éste capítulo la lista de la bibliografía consultada.

174 p.

Fil:Cohan, Norah Violeta. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

Las proteínas MAGE-I (Melanoma Antigen Gene) constituyen una de las familias multigénicas más grandes con expresión tumoral, la cual agrupa a los Mage-A, Mage-B, Mage-C. Estos genes se caracterizan por su expresión específica en tumores, por su alta conservación de secuencia (todos contienen un dominio común llamado MHD, Mage Homology Domain) y por su localización en el cromosoma X. Las primeras observaciones funcionales mostraron una correlación entre los altos niveles de expresión algunos Mage-A y la resistencia a drogas antitumorales. Así es que en los últimos años se ha investigado la potencial función de estos genes en distintos modelos. Nuestro grupo de trabajo ha aportado al estudio de los genes mage-I el mecanismo por el cual MageA2 causa la resistencia a ciertos agentes quimioterapéuticos e impide el gatillado de la senescencia inducida por PML mediante la activación de oncogenes como Ha-Ras. Estos mecanismos involucran, por un lado, la interacción de MageA2 con el oncosupresor p53 y la inhibición de su actividad transcripcional por la unión MageA2/HDAC3 (deacetilasa de histonas 3) formando el complejo inhibitorio p53/MageA2/HDAC3; y, por otro lado, une en forma directa a PML-IV (proteína de la leucemia promielocítica–3) interfiriendo en el eje PML-IV/p53. Las observaciones sobre la función y/o localización de otros MAGE-I nos llevaron a elaborar nuestra primera hipótesis: la conservación de secuencia dentro de esta familia de proteínas no implicaría necesariamente una redundancia funcional. Por otro lado, dada la relevancia de la función de p53, nos llevó a formular nuestra segunda hipótesis de trabajo: podrían existir vías intracelulares capaces de proteger a p53 de la actividad de MageA2. En la primera parte de este trabajo de Tesis caracterizamos otro miembro de la familia MAGE-I, del subgrupo B: la proteína MageB2 logrando evidenciar que la expresión de MageB2 induce proliferación en distintas líneas celulares en forma independiente de la inhibición de p53. Vinculamos la actividad de MageB2 a la regulación de factores de transcripción pro-oncogénicos como de la familia E2Fs y c-Myc. Además MageB2 se acumula en el nucléolo, aunque su distribución comprende tanto en citoplasma como en el núcleo también, dato que nos llevó a evaluar y evidenciar su asociación a los ribosomas. En la segunda parte de este trabajo de Tesis determinamos que la expresión de p14ARF (p14, Alternative Reading Frame) revierte la inhibición que MageA2 ejerce sobre p53 causando la relocalización de MageA2 del núcleo a los nucléolos en forma similar a lo que hace con Mdm2, un inhibidor de la función de p53. En conjunto, estos resultados demuestran que las proteínas MAGE-I podrían participar en el balance que existe en las células tumorales entre factores prooncogénicos y proteínas supresoras de tumor. Ciertas proteínas MAGE-I como MageA2 puede bloquear la actividad de p53, pero a su vez ser regulada por p14- ARF (en el caso que la célula tumoral la expresara). Por otro lado MageB2 colabora con el fenotipo proliferativo mediante la regulación de factores de transcripción oncogénicos como E2Fs y c-Myc.

El objeto del presente trabajo es encontrar un método de identificación químico de maderas, que puede ser accesible a personal de laboratorio no especializado, ya que actualmente todos los métodos de identificación estan basados en la observación de los caracteres anatómicos de la madera. En nuestro país hubo ya tentativas de análisis de maderas indigenas de parte de Pardo y Ricci primero y de Pizarro después, En el presente trabajo, siguiendo las mismas normas generales, se estudiaron 50 especies, 34 de ellas correspondientes a géneros estudiados por primera vez, y el resto a generos estudiados anteriormente, pero de distintas especies. I PARTE GENERAL I Composición química de la madera Se describen los dos grandes grupos en que se dividen los componentes de la madera desde el punto de vista químico: Componentes lignocelulósicos y Extractivos o Componentes menores, destacando la singular importancia de estos últimos, ya que entre ellos hay una gran diversidad de compuestos químicos que permiten realizar reacciones de caracterización. 2 Reacciones químicas cualitativas y cuantitativas Reacción de Maule Se ha observado que las maderas de especies Angiospermas, dan coloración rojiza con esta reacción, mientras que las Coniferes dan coloración parduzca. Los reactivos usados son: permanganato de potasio, ácido clorhídrico e hidróxido de amonio. Se cree que el permanganato de potasio origina una clorolignina que se colores al contacto con el amoniaco. Reacción de Styasny Mediante ella se identifican los taninos de la madera, precipitando los catéquicos con ácido clorhídrico y formol. Se complementa la reacción ensayando 1a coloración con sales férricas en el filtrado para identificar taninos pirogálicos. Reacción de Isenberg y Buchanan Tratando una astilla de la madera con ácido clorhídrico en solución metanólica, algunas maderas dan una coloración rojo púrpura. La formación de la coloración todavia no está aclarada. Fluorescencia Se observa la fluorescencia a la luz ultravioleta del extracto acuoso seco, disuelto en acetone. No se sabe con certeza la naturaleza de las sustancias que la originan en 1a mayoria de las maderas. Reacción de flavanonas El extracto alcohólico del aserrin se trata con ácido clorhídrico y magnesio metálico, originándose una coloración rojo guinda, debido probablemente a 1a presencia de la estructura 3-hidroxiflavanona y 3- dihidroflavanona. Prueba de la dilución Diluyendo el extracto alcohólico con un volumen igual de agua, la mezcla resultante es límpida, turbio u opalescente. La opalescencia en este ensayo, parece ser típica de maderas que contienen una cantidad apreciable de materias solubles en éter. Observación de la formación de espuma Durante los extractos acuosos, se tuvo en cuenta la formación de espuma durante la ebullición. Se consideró comopositiva, cuando la espuma llenaba completamente el matraz de 250 ml. empleado para la extracción. Determinación del porcentaje de cenizas Se seca primero el aserrín en la estufa para determinar humedad,luego se lo calcina a 600°; el porcentaje de cenizas se expresa respecto a la madera seca. El contenido en componentes minerales es, dentro de ciertos límites una constante para cada especie. Determinación de la alcalinidad de las cenizas A1 crisol que contiene las cenizas se le añade ácido sulfúrico 0,1 N, valorándose el exceso de ácido con hidróxido de sodio 0.1 N. La alcalinidad se expresa como el número de ml. de ácido necesarios para neutralizar las cenizas que provienen de un gramo de madera seca. Resumen y conclusiones La reacción de Maule ha permitido la separación de las 3 maderas de coniferas de las 47 latifoliadas. Con respecto a las latifoliadas fueron perfectamente individualizadas las 26 maderas siguientes: ñandubay, tintinaco, algarrobo negro, alpataco, mora amarilla, mata ojo, viraró, fumo bravo, chañar, tala, sangre de drago, churqui, lapacho negro, espina corona, cina-cina, molle dulce, olivillo, acacia visco, rama negra, molle, curupicaí, molle colorado, guaraniná, garabato, lata y palo cruz. En cuanto a las demás, se han podido agrupar, en base a un comportamiento común en 1 grupo de 4 maderas, 3 grupos de 3 maderas y 4 de 2 maderas. Las coniferas también fueron individualizadas perfectamente.