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Estudios sobre la transformación enzimática del ácido delta-amino levúlico en porfobilinógeno: Aislamiento, purificación y propiedades de la enzima delta-amino levúlico dehidrasa de hígado bovino

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Autores/as: Ana María Ferramola ; Moisés Grinstein ; Aldo E. A. Mitta

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Institución detectada Año de publicación Navegá Descargá Solicitá
No requiere 1972 Biblioteca Digital (FCEN-UBA) (SNRD) acceso abierto
Se describe un método para la síntesis química del ALA 4 14C. Se hace un estudio detallado sobre el aislamiento, purificación y propiedades de la enzima "Delta aminolevúlico dehidrasa". Se logró purificar la delta amino levúlico dehidrasa aislada de hígado vacuno unas 310 veces, resultando ser una enzima soluble. Es una enzima sulfhidrílica, cuya actividad es dependiente de la activación de grupos SH, con agentes tiol reductores, especialmente cuando se la purifica y estrictamente anaeróbico aún en las primeras etapas de su purificación. Presenta un pH óptimo a 6,8 en buffer de fosfato de potasio 0,067 M como en buffer Tris-ClH 0,05 M, aunque en este último buffer, la enzima es 30% menos activo. Es estable al calor y tiene una temperatura óptima de acción a 65°C, habiéndose determinado una energía de activación de 10.600 cal/mol. La formación de PBG resulta función lineal de la concentración de delta aminolevúlico dehidrasa, y del tiempo. Se determinó un PM de 140.000 ± 14.000 por el método de tamices moleculares, obteniéndose además evidencias que sugieren la existencia de subunidades de peso molecular 70.000 ± 7.000. Por electroforesis en gel de poliacrilamida y en gel de almidón a distintos pH, así como por ultracentrifugación se comportó como una única entidad proteica; determinándose un pI = 4,9. Tanto para la enzima previamente activada con cisteína, como para una preparación sin activar, se determinó sólo un grupo -SH funcional catalíticamente en cambio se titularon 3 grupos SH en presencia de urea 8 M. Por estudios comparativos con la delta amino levúlico dehidrasa purificada de callos de semilla de soya se ha propuesto un modelo estructural para ambas enzimas, con respecto a la distribución de los grupos -SH, en base a unidades de PM 140.000. En buffer Tris ClH la enzima presentó una curva de saturación sigmoidea con una [S0,5] = 3 x 10^(-4) M y un "n" de Hill igual 2,2, sin embargo en buffer de fosfato de potasio, el perfil cinético fué Michaeliano con un Km de 1,5 x 10^(-4) M. Se considera el ión fosfato, un efector heterotrópico positivo de la enzima. De los iones estudiados, sólo el Zn(++) produjo una ligera activación. No se determinó requerimiento de metales en especial, aunque la enzima fué inhibida por distintos agentes quelantes. Las bases púricas y nucleótidos de adenina a 10^(-2) M inhibieron marcadamente la actividad de la enzima. La delta amino levúlico dehidrasa de hígado vacuno fué inhibida por bajas concentraciones de Protoporfirina y Hemina. En base a esta inhibición, por producto final, al hecho de que esta enzima se encuentra ubicada en el punto de divergencia en la utilización del ALA, a que cataliza la síntesis del primer intermediario pirrólico exclusivamente utilizado en la biosíntesis de porfirinas a que en ciertas condiciones se comporta cinéticamente como una enzima alostérica, la delta levúlico dehidrasa en hígado vacuno estaría también involucrada en la regulación de la biosíntesis del Hemo en este tejido.

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Estudios sobre la transición vítrea y la estabilidad de biomateriales de baja humedad

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Autores/as: Carolina C. Schebor ; Jorge Chirife

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Institución detectada Año de publicación Navegá Descargá Solicitá
No requiere 2000 Biblioteca Digital (FCEN-UBA) (SNRD) acceso abierto

Cobertura temática: Biotecnología industrial  

La transición vitrea que se manifiesta macroscópicamente por cambios fisicos(ablandamiento del material) ocurre a una temperatura (Tg) que representa un punto critico para la movilidad de los componentes amorfos a nivel molecular. El objetivo de este trabajo de Tesis fue estudiar el efecto de la transición vitrea sobre la estabilidad enzimática y quimica en alimentos y biomateriales a muybajas humedades. El análisis se llevó a cabo estudiando reacciones susceptibles de estar afectadas por efectos de movilidad/difusión de los reactivos: resistencia térmica enzimática (enzima invertasa (β-fructofuranosidasa)) y pardeamiento no enzimático. Las conclusiones fueron las siguientes: 1. La temperatura de transición vitrea no puede ser utilizada como un umbral absoluto para predecir la inactivación térmica de la enzima invertasa, ni para definir la estabilidad con respecto a las reacciones de pardeamiento no enzimático en sistemas modelo y alimentos deshidratados. 2. Las matriz de trehalosa es superior a las matrices poliméricas en la protección de la enzima invertasa. 3. A altas temperaturas, la temperatura de almacenamiento per se es un factor más importante que T-Tg con respecto a la estabilización de la enzima invertasa y al desarrollo de pardeamiento no enzimático. 4. La estabilidad química de los azúcares frente a la hidrólisis, aun en condiciones de baja humedad, es un factor importante a tener en cuenta en la selección de matrices protectoras de biomateriales. 5. En sistemas de baja humedad los resultados obtenidos sugieren que el azúcar rafinosa podria considerarse como una alternativa de la trehalosa como matriz protectora de biomateriales.

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Estudios sobre la transmisión del Trypanosoma cruzi a niños y perros con énfasis en el rol de los reservorios caninos: un seguimiento de dos años

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Autores/as: Ricardo Esteban Gürtler ; María Cristina Wisnivesky Colli

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Institución detectada Año de publicación Navegá Descargá Solicitá
No requiere 1987 Biblioteca Digital (FCEN-UBA) (SNRD) acceso abierto
Entre noviembre de 1982 y de 1984 se realizó un estudio longitudinal de la dinámica de transmisión del T. cruzi a niños y perros en 20 viviendas de la población de Amama, Pcia. de Santiago del Estero, en la que nunca se había llevado a cabo una campaña oficial de desinsectación domiciliaria, y que al tiempo de la encuesta de 1984, aún se hallaba fuera de los programas gubernamentales de control. En ambas encuestas se estudió por serologia y xenodiagnóstico a todos los habitantes, incluyendo perros y gatos, y se realizaron capturas de T. infestans por unidad de esfuerzo en los dormitorios de cada una de las casas, siendo los insectos posteriormente examinados para detectar la presencia de T. cruzi en la materia fecal. Los resultados obtenidos indican que: a) la densidad domiciliaria de vectores infectados (DVI) se mantiene en niveles similares en casi todas las casas, aumentando significativamente en aquellas que abandonan sus hábitos de lucha contra el vector, b) aquella caracteristica, en consecuencia, se refleja en que las curvas de prevalencia de T. cruzi en función de la edad de los hospedadores y de la DVI presentan un patrón estable, c) la prevalencia y la incidencia del T. cruzi en la población de niños varía en función de la DVI existente en la vivienda, habiendo casas infestadas de "bajo riesgo" en las cuales no se observó la aparición de casos nuevos entre los niños susceptibles de contraer la infección en 1982 luego de 2 años de seguimiento, d) los perros se hallan expuestos a un mayor riesgo de infección que los niños que cohabitan la vivienda, y por lo tanto, pueden servir como centinelas naturales de la reintroducción del parásito al ciclo doméstico de transmisión una vez que se ha alcanzado la etapa de vigilancia epidemiológica, e) existe una fuerte asociación entre la presencia de perros infectados en la vivienda y prevalencia e incidencia de T. cruzi en niños, señalando a los reservorios caninos como un factor de riesgo para la población humana. Los resultados de los xenodiagnósticos realizados a 121 perros seropositivos del área de estudio entre 1982 y 1986 indican que la parasitemia por T. cruzi en perros naturalmente infectados evaluada por xenodiagnóstico no se halla asociada: a) a la edad; b) a1 sexo; c) a la existencia de reinfecciones mediadas por el vector en el ambito domiciliario, al menos luego de 1 año de interrumpida la transmisión vectorial. En consecuencia, y considerando las altas frecuencias de alimentación sobre perro de las poblaciones naturales de T. infestans de areas endémicas, los reservorios caninos deben considerarse los principales productores de vectores infectados en el ciclo doméstico de transmisión de areas rurales de la región chaqueña argentina. Esta caracteristica, unida a que los perros poseen mayor probabilidad de infección que los niños que cohabitan la vivienda, favorece la hipótesis de que el vínculo entre los casos nuevos infectados y la presencia de perros infectados en la vivienda sea de tipo causal indirecto a través del vector. Los censos de la población canina de Amamá realizados en 1985 y 1986 revelaron que la misma se halla en estado aproximadamente estacionario, con un tamaño estable de 101 individuos. Tanto la edad mediana de la población (2 años) como la expectativa de vida media a partir del destete (3,5 años) señalan una población joven con un fuerte recambio, en la cual el mayor factor de mortalidad hallado radica en la mano del hombre, quien sacrifica al momento del nacimiento el 33 al 50% de los cachorros nacidos vivos, especialmente las hembras, y asi regula la población. Con el objetivo de evaluar cual seria la caida en la prevalencia de T. cruzi en la población canina si se erradicara al vector domiciliario del area, los datos demográficos obtenidos se utilizaron para elaborar un modelo que describiese aquella situación. Este modelo, basado en una población en estado estacionario en la cual no existe transmisión vertical ni inmigración de perros infectados, y en la cual la mortalidad es independiente de T. cruzi, predice que la disminución en la prevalencia será función de la tasa de mortalidad específica por edades, de la estructura de edades y de la tasa de infección asociada a cada una de éstas. Un año después de la desinsectación de Amamá con piretroides de alto poder residual, se evaluó la infestación en la comunidad y la prevalencia de la población canina con el objetivo de validar el modelo construido. La prevalencia observada (59%) se acercó en forma altamente significativa al valor esperado (60%), indicando que el modelo refleja satisfactoriamente la dinámica del proceso, al menos en un corto plazo luego de la intervención contra el vector.

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Estudios sobre la utilización de biomasa algal como materia prima alternativa para la producción de bioetanol

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Autores/as: Lara Sánchez Rizza ; Leonardo Curatti ; Graciela Lidia Salerno

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Institución detectada Año de publicación Navegá Descargá Solicitá
No requiere 2019 CONICET Digital (SNRD) acceso abierto

Cobertura temática: Ciencias biológicas  

El continuo incremento demográfico, así como la industrialización, demandan grandes cantidades de energía. La bioenergía cumple un rol muy importante en la mitigación de la emisión de gases de efecto invernadero, así como en el reemplazo de los combustibles fósiles (Demirbas & Demirbas, 2010).Los biocombustibles líquidos, como el bioetanol y el biodiesel son importantes para el futuro debido a que reemplazan a los combustibles derivados del petróleo. El bioetanol deriva de recursos naturales renovables, típicamente de plantas como el trigo, remolacha azucarera, maíz, residuos lignocelulósicos y madera (Demirbas, 2009). El biodiesel es obtenido de plantas oleaginosas tales como la soja o colza (Rulli et al., 2016).El uso de cultivos agrícolas como materia prima para la producción de biocombustibles plantea serias dudas sobre su sustentabilidad debido a sus posibles efectos en la seguridad alimentaria y los problemas ambientales relacionados con el cambio en el uso de la tierra, la huella hídrica y la gran dependencia de los fertilizantes sintéticos, entre otras preocupaciones (Tilman et al., 2002; Erisman et al., 2008; Gerbens-Leenes et al., 2009).Las microalgas y las cianobacterias se consideran una alternativa cada vez más prometedora a los cultivos convencionales (y residuos lignocelulósicos), como materia prima para la producción de biocombustibles y suplementos para la alimentación animal, debido principalmente a su mayor productividad fotosintética y a una composición bioquímica más favorable (ausencia de lignina), así como la posibilidad de cultivo en tierras no aptas para la agricultura, entre otras características. Un impedimento para la implementación a gran escala del cultivo de estos organismos es el requerimiento insostenible de fertilizantes N y P, así como también los altos costos asociados a la colecta de la biomasa. Hay un acuerdo generalizado en que la obtención únicamente de biocombustibles a partir de biomasa de microalgas no es rentable económicamente, por lo que se presume que la co-producción de productos de alto valor agregado en el marco de una biorrefinería, incrementaría la rentabilidad de producir aceites o azúcares a partir de microalgas, con un mínimo de residuos y emisiones (Demirbas, 2009).En esta tesis proporcionamos una prueba de concepto para una plataforma de ciclo semi-cerrado de producción de algas y la biorrefinería de la biomasa obtenida, para la producción de etanol y biodiesel a expensas del CO2 y N2 atmosféricos, y del P de harina de huesos. Esta plataforma brinda conceptos de economía circular en el campo de la biorrefinería de biomasa de microalgas. En esta plataforma, el N2 se asimila en la biomasa de una cianobacteria fijadora de N2 (Nostoc sp. cepa M2) que acumula niveles muy altos de biomasa (2 g peso seco.L-1) y proteína (60 % p/p). Esta cepa se seleccionó debido a su rápido crecimiento y a la característica decantación de sus células en períodos muy cortos de tiempo (15-30 min).La extracción acuosa de esta biomasa produjo un fertilizante orgánico, que sostuvo el crecimiento mixotrófico como única fuente de nutrientes, de una amplia diversidad de géneros de microalgas. Se demostró la completa sustitución de fertilizantes nitrogenados químicos mediante el proceso de fijación biológica del N2 con una conversión eficiente de biomasa de la cianobacteria fijadora de nitrógeno en biomasa de microalgas con alto contenido de aceites o azúcares fermentables. Asimismo, se demostró la posibilidad de obtener ficobiliproteínas de alto valor agregado a partir de estos extractos libres de células, de inocuidad aparente.Los rendimientos de producción de aceites de Chlorella sorokiniana (42 % lípidos p/p), en simulaciones en fotobiorreactores ambientales estuvieron en el rango de los rendimientos actuales obtenidos a expensas de fertilizantes sintéticos para microalgas cultivadas en piletas a cielo abierto (10.000-13.000 L-1.ha.año-1) y fueron 20 veces superiores al rendimiento reportado cuando se utilizan cultivos agronómicos (soja) como materia prima.A partir de la bioprospección de microalgas nativas de nuestra colección se seleccionaron 3 cepas con potencial biotecnológico (Desmodesmus sp. cepa FG, Chlorella sp. cepa MI y la cepa SP2-3) para la producción de etanol mediante la evaluación de su capacidad para acumular azúcares fermentables en condiciones de estrés nutricional. Se seleccionó a la microalga Desmodesmus sp. cepa FG debido a que presentó rendimientos muy altos (8 g peso seco.L-1), y un crecimiento robusto que acumuló altos niveles de carbohidratos (60 % p/p). La biomasa de algas se sacarificó y esta condición ácida se utilizó secundariamente para liberar fosfato soluble de diferentes fuentes de P renovables, incluida la harina de huesos. Después de aumentar el pH, la preparación resultante se fermentó con levaduras para producir etanol con valores aproximados al 90 % de su rendimiento teórico. Se pudo demostrar tanto una alta eficiencia de conversión de biomasa a etanol de 0,25 g·g biomasa-1 como una alta concentración de etanol en el caldo de fermentación de 24 g etanol.L hidrolizado-1; así como también se ha obtenido CO2 como una fuente puntual reutilizable a rendimientos cercanos al máximo teórico.La simulación de la productividad de la microalga a expensas del fertilizante orgánico a base de Nostoc en fotobiorreactores ambientales, que imitan las condiciones de estanques abiertos dio como resultado que con la eficiencia de conversión de biomasa a etanol demostrada en esta tesis, esta plataforma podría producir, bajo las condiciones ambientales del Sudeste de la provincia de Buenos Aires, entre 7.600 y 10.800 L de etanol.ha-1.año-1, dependiendo de si Nostoc se cultiva en estanques al aire libre o en fotobiorreactores tubulares, respectivamente. Los rendimientos de producción de etanol fueron 2-3 o 5-7 veces superiores al rendimiento reportado cuando se utilizan como materia prima granos de maíz o residuos lignocelulósicos (Karlen et al., 2011; Pimentel & Patzek, 2005).La vinaza de fermentación resultante, suplementada con P, se recicló eficientemente como única fuente de macronutrientes para el cultivo de la biomasa de la cianobacteria fijadora de N2 para cerrar un ciclo de producción.También se muestra el reciclado de agua y la co-producción de biomasa residual como posible suplemento nutricional para producción animal y yeso, que puede utilizarse como material para la construcción o como una enmienda para suelos.La plataforma de ciclo semi-cerrado de producción de biomasa algal a partir de materias primas económicas y renovables, el reciclado intensivo de nutrientes y la minimización de desechos, introducen conceptos de economía circular a la biotecnología algal. Se espera que diseños de este tipo contribuyan a la seguridad alimentaria y energética a largo plazo.

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Estudios sobre lentes gravitacionales con objetos relativistas

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Autores/as: Ernesto Fabián Eiroa ; Gustavo E. Romero ; Diego F. Torres

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Institución detectada Año de publicación Navegá Descargá Solicitá
No requiere 2002 Biblioteca Digital (FCEN-UBA) (SNRD) acceso abierto

Cobertura temática: Ciencias físicas  

En esta Tesis se estudian distintas clases de lentes gravitacionales, trabajando con fuentes y/o lentes relativistas. Se hace una revisión de distintos objetos relativistas como ser agujeros negros, núcleos galácticos activos y agujeros de gusano, y se resumen los aspectos básicos de la teoría de lentes gravitacionales. Se muestra que algunas fuentes de rayos gama no identificadas ubicadas a altas latitudes pueden ser el resultado de la amplificación gravitacional, debido a una estrella dentro de una galaxia interpuesta, de las regiones interiores de núcleos galácticos activos débiles y distantes. Las regiones de rayos gama más interiores pueden sufrir gran amplificación, mientras que no hay amplificación para las frecuencias de radio, resultando en la ausencia de contrapartes fuertes. Se analizan los efectos de cromaticidad introducidos por el tamaño finito de la fuente cuando la lente gravitacional es un agujero de gusano. Estos efectos permiten distinguir entre los agujeros de gusano y otros objetos de materia ordinaria por medio del análisis de las curvas de luz y de los espectros. Se discute también la posibilidad de detección astronómica de dichos efectos. Se estudia el escenario donde la lente gravitacional es un agujero negro de Reissner-Nordström, obteniéndose, en el límite de campo fuerte las posiciones y las amplificaciones de las imágenes relativistas. El formalismo desarrollado se aplica al caso de un agujero negro cargado poco masivo ubicado en el halo galáctico y se compararan los resultados con los obtenidos para el caso de un agujero negro de Schwarzchild de igual masa.

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Estudios sobre los mecanismos de desnudamiento y encapsidación del virus del dengue

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Autores/as: Laura Andrea Byk ; Andrea V. Gamarnik

Disponibilidad
Institución detectada Año de publicación Navegá Descargá Solicitá
No requiere 2016 Biblioteca Digital (FCEN-UBA) (SNRD) acceso abierto

Cobertura temática: Ciencias biológicas - Ciencias de la salud  

El virus del dengue es un importante y creciente problema de salud pública en todo el mundo, dejando a aproximadamente la mitad de la población mundial en riesgo de infección. En la actualidad no se encuentran disponibles antivirales ni vacunas efectivas. En esta tesis se estudiaron los procesos de encapsidación y desnudamiento del virus del dengue, con el foco puesto en la proteína de cápside. Se identificaron requerimientos de residuos básicos en la zona de la α4 de cápside, detallando la necesidad de una densidad de carga positiva en la zona, así como también residuos básicos en posiciones puntuales. Esto permitió proponer un modelo en el cual tanto la región N-terminal desestructurada como la zona C-terminal contribuirían al compactado del genoma viral. Por otro lado, se identificaron por primera vez PTMs en la proteína de cápside de dengue. La presencia de distinto tipo de modificaciones en cápside aislada de células o partículas virales podría indicar una selección de la proteína que se encapsida. Por último, se estudió el mecanismo de desnudamiento de dengue y se demostró que la liberación al citoplasma del genoma que entra dentro de la partícula viral depende de la maquinaria de ubiquitinación, pero no de la actividad del proteasoma, poniendo en evidencia un paso vulnerable para el desarrollo de estrategias antivirales.

tesis Acceso Abierto
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Estudios sobre mieles de abeja (Apis mellífera) de producción nacional: evaluaciones de contenidos en nitrógeno total, lípidos totales y sus composiciones acídicas y valores de la relación glucosa/levulosa

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Autores/as: Adriana S. Pereyra Gonzales ; Pedro Cattaneo

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Institución detectada Año de publicación Navegá Descargá Solicitá
No requiere 1993 Biblioteca Digital (FCEN-UBA) (SNRD) acceso abierto
Fil:Pereyra Gonzales, Adriana S.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

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Estudios sobre respuestas inmunológicas inducidas por antígenos de la fracción flagelar de Trypanosoma cruzi

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Autores/as: Diana Silvia Hansen ; Mirta Alicia Carlomagno

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Institución detectada Año de publicación Navegá Descargá Solicitá
No requiere 1995 Biblioteca Digital (FCEN-UBA) (SNRD) acceso abierto
Fil:Hansen, Diana Silvia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

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Estudios sobre tropomiosina de invertebrados

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Autores/as: Celia Prilleltensky De Milstein ; K. Bailey

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Institución detectada Año de publicación Navegá Descargá Solicitá
No requiere 1963 Biblioteca Digital (FCEN-UBA) (SNRD) acceso abierto

Cobertura temática: Ciencias biológicas  

La tropomiosina A (TM A) o paramiosina es una molécula extremadamente asimétrica, de forma de bastón cuya estructura predominante es de α-hélice y cuyas propiedades han sido asociadas con la tonicidad del músculo aductor de los lamelibanquios. La TM A aislada de Aulacoaya magellanica (cholgas recogidas en Puerto Deseado, R. Argentina) cristaliza en forma de agujas muy similares a las de TM A de Pinna nobilis. Constituye casi un 1% en peso seco del músculo aductor del molusco, valor algo mayor al que se obtiene para Peeten maximus, pero bastante inferior al de Pinna. Su solubilidad en sulfato de amonio (precipita entre 21 y 34 % de saturación) así como su constante de sedimentación (3.13 a concentración de proteína igual a cero) coinciden con las de TM A de Pinna y Pecten. Su espectro de absorción presenta un máximo a 276 mμ con un coeficiente de extinción E1cm ^1%= 3.4 (280 mμ) indicativo de un muy bajo contenido en aminoácidos aromáticos. El peso molecular para el método de Archibald dió un valor de 258,000 +- 16,000 similar al obtenido por el mismo método para la paramiosina de Venus. Se asigna sin embargo, un peso molecular máximo de 130,000; los valores anotados se atribuyen a la formación de agregados. Posee grupos básicos como C-terminales. Determinaciones de aminoácidos N-terminales por el método de fluorodinitrobenceno dieron 0.6 moles de dinitrofenil-alanina por cada 130,000 g. de proteína.Por todo ello y por dejar un fragmento al ser digerida por tripsina, la proteína aislada de Aulacomya debe ser clasificada como TM A con propiedades similares a las de Pinna y Pecten. Sin embargo el valor de su viscosidad intrínseca (0.80) está muy por debajo del valor observado para las TM A de Pinna y Pecten; aproximándose mucho al de la TM B de Pecten. La variación de la velocidad de sedimentación con la concentración de proteína (0.051) es también menor que la de la TM A de Pinna (0.095). Ambos resultados sugieren una menor asimetría o hidratación molecular. La velocidad y extensión de la acción de la tripsina sobre la TM A de Pinna nobilis, Peeten maximus y Aulacomya mageilanica fué seguida por diferentes métodos a saber, nitrógeno total, contenido de α-amino nitrógeno y arginina en la fracción soluble en ácido tricloroacético, consumo de álcali y residuos N-terminales en la mezcla de digestión. Los resultados obtenidos permiten decir que el número de uniones rotas por la tripsina es aproximadamente la mitad del número de uniones susceptibles presentes en la molécula. Colaboran a sostener esta conclusión los estudios físicos y químicos realizados sobre el fragmento que queda después del tratamiento trípsico de la proteína nativa. La mayor parte de la arginina liberada durante la proteólisis está en la forma de arginina N-terminal o arginina libre desde que cerca de un 80% de la arginina total liberada por la enzima está presente como dinitrofenil-arginina en la fracción soluble del digerido tratado por fluorodinitrobenceno. La cinética de la proteólisis se estudió por dos métodos diferentes y se observó claramente la existencia de por lo menos dos o posiblemente tres reacciones simultáneas que ocurrían a diferentes velocidades. Las constantes de velocidad sugieren que una clase de uniones peptídicas es mucho más susceptible al ataque que otras. La extensión de la digestión de TM A de Pecten y Aulacomya con tripsina es muy similar a la de TM A de Pinna. Una digestiión prolongada (24 horas) de TM A de Pinna, Pecten y Aulacomya deja un fragmento de caracter proteico. El fragmento de Pinna fué estudiado en detalle. Parece ser un producto bien definido de peso molecular de alrededor de 85,000 cuya composición de aminoácidos es muy similar a la de la proteína nativa. La técnica del fluorodinitrobenceno reveló ácido glutámico como residuo N-terminal predominante, acompañado de vestigios de dinitrofenil-serina, dinitrofenil-glicina, dinitrofenil-alanina y dinitrofenil-fenilalanina. La carboxipeptidasa B reveló que contiene 8.6 residuos de lisina e igual número de residuos de residuos de arginina en la posición C-terminal. Determinaciones físico- químicas de viscosidad intrinseca y la dependencia de la velocidad de sedimentación con la concentración sugieren que la molécula se ha hecho menos asimétrica. Las propiedades de solubilidad y la carga neta del fragmento trípsico son similares a las de la tropomiosina soluble (TM B). Sin embargo, las dos proteínas difieren en su variación de viscosidad con la fuerza iónica y en su comportamiento frente a la tripsina. La acción de la tripsina sobre el fragmento tratado bajo diversas condiciones ("desnaturalización" por calor, urea, ácido tricloroacético, eliminación de metales, alta fuerza iónica, solventes orgánicos) no producen una digestión apreciable. Lo mismo ocurrió cuando se trató el fragmento con enzimas tales como quimotripsina y elastasa. La pepsina en cambio, parece destruir el fragmento en péptidos con una gran tendencia a la agregación. El material difusible al cabo de la digestión prolongada de TM A consiste en una mezcla de péptidos pequeños y arginina y lisina libres. Estos dos aminoácidos tambien forman parte de los péptidos neutros, básicos y acídicos. Se discuten los resultados sobre la base de la estructura secundaria conocida de la TM A. La acción de la tripsina no sigue un modelo simple. Aparentemente se opera un profundo cambio en la configuración de la molécula durante los primeros 15 minutos de la digestión y la estructura terciaria y la alta concentración de cargas negativas pueden ser causas de la resistencia del nuevo fragmento a la proteólisis. Cuando se digirió TM A de Pinna con quimotripsina durante 24 horasm se obtuvo una considerable cantidad de material difusible y quedó un fragmento no dializable. Este fragmento tiene una composición de aminoácidos muy similar a la de la TM A, conteniendo aún fenilalanina y tirosina. La digestión, si prosigue, es extremadamente lenta. Se realizó un estudio comparado de la digestiones prolongadas de TM A, TM V y miosina: 1) La digestión con tripsina parece ser un método simple para diferenciar TM A de TM B porque la primera deja un fragmento proteico mientras que la segunda se digiere completamente. 2) La miesina no parece incluir la molécula de TM A como parte integrante de su estructura, como fuera sugerido por algunos autores.

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Estudios taxonómicos y de estrategias reproductivas en orquídeas de la subtribu Chloraeinae Pfitzer con énfasis en especies de distribución oriental

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Autores/as: Agustín Sanguinetti ; Sara Maldonado ; Rodrigo B. Singer

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Institución detectada Año de publicación Navegá Descargá Solicitá
No requiere 2016 Biblioteca Digital (FCEN-UBA) (SNRD) acceso abierto

Cobertura temática: Ciencias biológicas  

Las orquídeas Chloraeinae Pfitzer son endémicas de Sudamérica y esencialmente andinas, extendiéndose desde Perú hasta Tierra del Fuego e Islas del Atlántico Sur. La subtribu consta de cerca de 70 especies agrupadas en tres géneros: Bipinnula Commerson ex Jussieu, Chloraea Lindley y Gavilea Poeppig. Ocho especies ocurren sobre la margen oriental del continente. Para este subgrupo se realizaron extensos trabajos de prospección a campo y en herbarios, los cuales permitieron elaborar una primera sinopsis taxonómica completa ya que al presente muchas de esas especies eran apenas conocidas. Para la mayoría de ellas se proveen fotografías de caracteres diagnósticos, así como comentarios nomenclaturales, ecológicos, de distribución y sobre su material típico. En relación a su biología reproductiva, las cinco especies orientales de Bipinnula, Chloraea membranacea y la especie patagónica C. virescens dependen de polinizadores para fructificar. Las estrategias empleadas son el engaño alimenticio, la provisión de refugio y el engaño sexual, dependiendo de la especie en cuestión. Con base en la filogenia disponible para la subtribu se infiere que la estrategia de engaño sexual sería una condición apomórfica de un subclado formado por tres especies. Un hallazgo importante desde el punto de vista ecológico es el que se reporta sobre las especies andino-patagónicas C. virescens y Brachystele unilateralis (Spiranthinae): en ambas, el servicio de polinización originalmente efectuado por el abejorro endémico y amenazado Bombus dahlbomii ha sido satisfactoriamente reemplazado por abejas invasoras europeas.