Catálogo de publicaciones

El Síndrome X, caracterizado por resistencia insulínica (RI), tiene una gran incidencia en la comunidad y aún los mecanismos íntimos que conducen a su desarrollo no están completamente dilucidados. Por ello, es necesario orientar los esfuerzos para tratar de prevenir o mejorar las condiciones de salud de la población en general. Experimentalmente, podemos lograr un modelo similar por manipulación dietaria, con la administración de una dieta rica en sacarosa (DRS). El tejido adiposo (TA) es clave en el desarrollo de RI. Por ello, los objetivos generales de este trabajo fueron: 1) Analizar mecanismos que relacionen cambios morfológicos, funcionales y moleculares del TA en el modelo experimental a largo plazo DRS, 2) Determinar cómo estos cambios contribuyen a la hiperglucemia, RI y dislipidemia, observada en estos animales y 3) Analizar si la sustitución parcial del tipo de ácidos grasos (AG) de la dieta (aceite de maíz –rico en AG n-6- por aceite de hígado de bacalao (AHB) - rico en AG n-3) contribuye a mejorar y/o revertir estas anormalidades. A través de los resultados obtenidos durante el desarrollo de este trabajo de tesis, podemos concluir que el TA cumple un rol clave en las alteraciones funcionales y metabólicas presentes en el modelo experimental de dislipidemia y RI inducido por la administración prolongada de una DRS. Cambios en uno de los macronutrientes de la dieta (lípidos) como lo es la sustitución parcial del tipo de AG (n-6 origen vegetal por n-3 origen marino), logran modificar favorablemente las anomalías metabólicas antes descriptas.

Frente a situaciones de sobrecarga hemodinámica (de presión o de volumen) el corazón responde aumentando su masa fundamentalmente a expensas del crecimiento de los miocitos, condición conocida como hipertrofia cardíaca (HC). Sin embargo, el corazón está compuesto varios tipos celulares tales como cardiomiocitos, fibroblastos, células endoteliales, células de musculo liso vascular y una matriz extracelular. Si bien los cardiomiocitos constituyen sólo un tercio del número total de células, representan entre el 70-80 % de la masa cardíaca y el crecimiento postnatal del corazón ocurre principalmente por el aumento del tamaño de estas células musculares estriadas. La HC puede ser una adaptación favorable frente a un aumento del trabajo cardíaco (HC fisiológica), como ocurre en individuos sanos que realizan rutinas de entrenamiento físico isotónico o durante el embarazo. Por el contrario, puede representar la antesala de la insuficiencia cardíaca (HC patológica) cuando es desencadenada en el marco de enfermedades cardiovasculares tales como la hipertensión arterial, algunas valvulopatías o el post infarto agudo de miocardio. Más aun, la HC patológica es uno de los principales factores independientes de riesgo cardiovascular asociado habitualmente al desarrollo de arritmias, insuficiencia cardíaca y muerte. En este sentido, es importante recordar que las enfermedades cardiovasculares representan la principal causa de mortalidad en los países desarrollados, siendo en la República Argentina, según datos del Ministerio de Salud, responsables de alrededor de 100 mil muertes por año. Por lo tanto, resulta imprescindible el desarrollo de mejores estrategias terapéuticas. La activación crónica del sistema renina-angiotensina- aldosterona favorece el desarrollo de varias enfermedades cardiacas en las que la HC patológica ocupa un lugar preponderante. En este contexto, la hiperactividad de la isoforma 1 del intercambiador Na+/H+ (NHE-1) juega un rol clave. El objetivo del siguiente trabajo de Tesis Doctoral fue prevenir el desarrollo de HC patológica inducida infusión crónica por angiotensina II (ANGII) mediante el silenciamiento génico del NHE-1 en el miocardio. La inyección intramiocárdica de un lentivirus portador de una secuencia de ARN de interferencia (ARNi) contra el NHE-1 (lshNHE1) redujo significativamente la expresión del NHE-1 exclusivamente en corazón.(~ 48 %) y previno el remodelado cardiaco en ratas Wistar expuestas a ANGII (peso biventricular/longitud de la tibia: 24,03 ± 0,7915 mg/mm vs. 28,45 ± 0,9779 mg/mm y % de colágeno 2,526 ± 0,5003 vs. 5,982 ± 1,043; l-shNHE1 + ANGII vs ANGII, respectivamente). Interesantemente, estos resultados se acompañaron de una mejora en la función cardíaca evaluada mediante ecocardiografía, a pesar de no generase cambios en la presión arterial sistémica que permaneció elevada en el grupo inyectado con lshNHE1 (Δ Fracción de acortamiento 0,5960 ± 0,4228 vs. -0,9567± 0,06888 y presión arterial al final del tratamiento con ANGII 141,2 ± 6,117 mm Hg vs. 134,1 ± 6,723 mm Hg; l-shNHE1 + ANGII vs ANGII, respectivamente). Por otra parte, la infusión de ANGII produjo un aumento significativo en la actividad de la enzima NADPH oxidasa, sin ser evitado por la inyección del l-shNHE1; aunque sí evitó el aumento del estrés oxidativo revelado por la normalización de la peroxidación lipídica medida por la técnica de T-BARS (12,40 ± 2,887 vs. 23,05 ± 1,537; l-shNHE1 + ANGII vs. ANGII, respectivamente). Estos resultados permiten especular sobre la posibilidad de que la inyección intramiocárdica de un lentivirus portador de una secuencia de ARNi contra el NHE-1 pueda convertirse en un futuro no tan lejano, en una herramienta para la prevención de la HC patológica inducida por ANGII. Antes, será necesario evaluar y resolver aspectos de índole ética, sobre la posibilidad de efectos cancerígenos por la inserción en sitios no deseados del genoma viral, la duración del silenciamiento o necesidad de reiteración de la administración, entre los más importantes.

La regresión y/o modificación de la HCP es considerada en la actualidad como un paso clave en la prevención del desarrollo futuro de IC. Una forma de lograrlo es farmacológica y la otra es no farmacológica. Esta última consiste en la realización de ejercicio físico aeróbico en forma regular. En pacientes con cardiopatías (HC e IC) se ha demostrado que la actividad física programada no sólo es beneficiosa, sino también segura (197-199). Diferentes estudios clínicos muestran que la actividad física promueve un fenotipo “cardioprotector”, pero los mecanismos íntimos a nivel celular aún se desconocen (200-202). El objetivo general del presente trabajo consiste en estudiar experimentalmente los posibles mediadores intracelulares involucrados en la protección brindada por el ejercicio físico en la HC hipertensiva. Para llevar acabo dicho objetivo se empleó el modelo de HC de las ratas SHR que desarrolla HTA, genéticamente determinada. La identificación precisa de los intermediarios de la vía de señalización, permitiría un mejor control terapéutico de los mismos. Los experimentos diseñados intentaron responder los siguientes interrogantes: 1. ¿La actividad física produjo cambios funcionales en la HC de las SHR? De ser así, ¿qué características tuvieron? A fin de responder esta pregunta los animales realizaron actividad física natatoria durante 60 días y se determinó el acortamiento medio ventricular, por ecocardiografía, al comenzar y finalizar el período experimental. 2. ¿Qué características morfológicas se observaron en la HC lograda por el ejercicio? Para cuantificar la magnitud de los posibles cambios se evaluaron los siguientes parámetros: índice de masa ventricular izquierda, espesor de la pared del ventrículo izquierdo (VI), masa del VI y relación peso del VI/longitud de la tibia, entre otros. 3. ¿Qué modificaciones histológicas se produjeron en el tejido miocárdico inducidas por el entrenamiento aeróbico? Para ello se examinó el área de sección transversal del cardiomiocito, la fracción de colágeno y la densidad capilar. 4. ¿Qué cambios moleculares se observaron con el ejercicio? Para ello se determinó la expresión de los marcadores moleculares ANF y MLC-2, y la participación de SERCA2a y NCX. 5. ¿Las vías de la fosfatasa calcineurina y de las quinasas PI3K/AKT se involucraron en la HC por el ejercicio? Ello se evaluó mediante la expresión de dichas vías en el modelo utilizado. 6. ¿El ejercicio ejerció algún efecto sobre la cascáda apoptótica? Para ello se estudió la expresión de caspasa-3 y PARP-1. Las respuestas a estas preguntas son por lo tanto importantes y contribuirían al desarrollo de estrategias terapéuticas destinadas a inducir cardioprotección.

En esta tesis de doctorado se ha realizado un estudio acerca de una de las complicaciones post tiroidectomía total (TT), la hipocalcemia, para investigar en primer lugar la frecuencia de presentación, y se comprobó que, sobre un total de 174 pacientes a los que se les practicó tiroidectomía total entre el año 2000 y el 2006, la misma estuvo presente en 72 casos es decir en el 41.38% con valores de calcio en sangre de 8,0mg/dl o menos. Sin embargo llamó la atención la proporción de pacientes que fueron sintomáticos, resultando solo 14 casos sobre las 174 TT, el 8% y si analizamos estos 14 casos sintomáticos sobre el total de 72 pacientes con valores de calcio en sangre de 8,0mg/dl o menos, el porcentaje será de 19.44%. Simultáneamente se realizó en el post operatorio controles de calcemia a las 6 hs.; a las 12 hs.; y a las 24 hs. para comprobar que valor tenía hacer determinaciones en distintos tiempos una vez finalizada la cirugía; y se analizó la calidad de éstas mediciones postoperatorias de calcio a las 6 hs., a las 12 hs. y a las 24 hs., considerando a esta última el Gold Standard, y a la de las 6 hs. de menor sensibilidad que a las 12 y 24 hs. También se analizaron distintas variables y se comprobó que no aumenta la frecuencia de la hipocalcemia en mujeres mayores de 40 años, tampoco en las enfermedades malignas y en las cirugías más amplias que Tiroidectomía total. El presente trabajo de tesis puede contribuir a mejorar el conocimiento de la hipocalcemia post tiroidectomía total, por los resultados de laboratorio hallados en ésta serie de pacientes con una frecuencia del 41.38%,con valores de calcio de 8.0 o menos, impulsa a la utilización de una normatización del monitoreo de la calcemia pre y post tiroidectomía total, para poder advertir anticipadamente las alteraciones del mismo y también a proponer que aquellos pacientes que tengan éstos valores de calcio (de 8,0 o menos) proponemos considerarlos población en riesgo de padecer síntomas, pues en éste grupo es donde más se presentaron en el post operatorio de una tiroidectomía total, aun sin sintomatología se deberá prever un tratamiento ambulatorio, dado que la mayoría de los pacientes abandonan a las 48 hs. el hospital, y la indicación de calcio oral logrará evitar posibles complicaciones. Los puntos fuertes del trabajo se pueden centrar en que: 1- Todos los pacientes fueron operadas por el mismo equipo quirúrgico. 2- Los análisis de calcemia se realizaron en la misma institución. 3- Las determinaciones a las 6,12 y 24 hs. y el estudio clínico sintomático fue normatizado. 4- Las variables analizadas fueron las que estimamos de más riesgo potencial. Y los puntos débiles: principalmente la asimetría en la distribución de sexos, pero la explicación de esto es que la patología de tiroides es más frecuente en la mujer que en el hombre, 8 veces a 1.

Se evaluaron en forma retrospectiva los pacientes asistidos en un servicio de Endocrinología y Nutrición de la ciudad de La Plata durante un año. De un total de 3744 consultas anuales, el 46% correspondió a enfermedades tiroideas. Durante el año en estudio, 39 pacientes hipotiroideas cursaron un embarazo. Ello corresponde al 5% de las pacientes hipotiroideas y al 2% del total de las consultas por tiroideopatías. La tiroiditis autoinmune fue la causa del hipotiroidismo en el 85% de las pacientes. El 51% de las pacientes asistió al especialista en el primer trimestre del embarazo. Los anticuerpos anti tiroideos fueron positivos en el 40-80% de las pacientes. La sintomatología más frecuente entre las pacientes en estudio fue el bocio, sequedad cutánea, caída exagerada del cabello, astenia psicofísica y constipación El 25% de las pacientes tuvo antecedentes de abortos espontáneos. El 20% de las pacientes del presente estudio estaban sin tratamiento sustitutivo al momento de la primera consulta Las patologías más frecuentemente halladas en las pacientes fueron el asma bronquial, el sindrome de ovario poliquístico, y la hipertensión arterial. De las 39 pacientes estudiadas, pudieron recolectarse los datos de 25 recién nacidos La hipertensión arterial fue la complicación materna más frecuente y se asoció a la consulta tardía y a valores supranormales de TSH Los anticuerpos antitiroideos fueron positivos en el 100% de las pacientes que presentaron complicaciones. El parto de pre término fue la complicación fetal mas frecuente y se presentó en recién nacidos de madres con hipotiroidismo clínico y bioquímico y autoinmunidad tiroidea positiva.

A fin de detectar HSC se incluyeron en el estudio 427 pacientes que fueron divididos en 3 grupos: no obesos, obesos diabéticos y obesos no diabéticos. Para el diagnóstico se compararon dos valores de corte máximo de TSH basal: entre 3 y 4 mUI/L y mayor de 4 mUI/L, siempre con T4 libre en valores normales (0,8-2 ng%). En el grupo de no obesos, el 3,3% tuvo TSH basal entre 3 y 4 y el 6% >4mUI/L. En el grupo de obesos diabéticos la TSH basal fue de 3-4 mUI/L en el 17,3% y >4mUI/L en el 22,6%. Por lo tanto, si se toma un valor de corte máximo de TSH de 4 mUI/L, el HSC se diagnostica en el 6% de los no obesos, en el 23,8% de los obesos sin diabetes y en el 22,6% de los obesos diabéticos, mientras que esos valores ascienden a 9,3%, 39,2% y 39,9% respectivamente al reducir el límite a 3-4 mUI/L. En relación a los anticuerpos antitiroideos (ATPO y ATG), son positivos, uno o ambos, en el 17,89% de los que tienen TSH entre 3 y 4 mUI/L y en el 24,21% de los que poseen más de 4 mUI/L. Se propone utilizar una clasificación clínico-terapéutica práctica del HSC. Conclusión: El HSC se asocia con mayor frecuencia a la obesidad aislado o asocidad a la diabetes tipo 2 respecto a los no obesos.

Se describen, a nivel estructural y ultraestructural, las branquias de Chasmagnathus granulata y Uca uruguayensis, en relación a su participación en los procesos de respiración, regulación iónica y del equilibrio ácido-base, en medios de distinta concentración iónica y durante la respiración acuática y aérea. Las branquias de ambas especies presentan tejido ionoregulador, el cual cambia su ultraestructura como respuesta al cambio de salinidad. Las diferencias anatómicas se discuten en función de la estrategia respiratoria en aire. La regulación de distintas variables respiratorias, iónicas y ácido-base, se estudia por medio de experimentos fisiológicos y bioquímicos, en sumersión y en exposición al aire. Se consideran los cambios en las variables independientes que controlan el pH, pCO2 y SID y la participación de la enzima anhidrasa carbónica. Los posibles ajustes en las funciones cardiorespiratorias en medio acuático y aéreo, se estudian por medio del registro de las frecuencias cardiaca y de batido del escafognatito; en condiciones normales y con inhibición de anhidrasa carbónica.

El objetivo de nuestro trabajo fue comparar la evolución del páncreas endocrino durante la vida de dos cepas murinas, una normal (Sprague Dawley) y una diabética espontánea (eSMT) a través del estudio de diferentes variables morfológicas y plasmáticas, con el propósito de analizar las alteraciones observadas en dichas líneas y aportar nueva información referente al desarrollo de la patología diabética tipo 2. En el presente estudio se utilizaron ratas macho de 4, 24 y 30 meses de edad de una cepa normal (Sprague Dawley); y de 2, 5, 10, 14 y 18 meses de una línea diabética espontánea (eSMT). Los individuos fueron mantenidos a 22 ± 2ºC, bajo un ciclo de 12/12 horas luz / oscuridad con una dieta estándar y agua ad libitum. Los páncreas extraídos fueron fijados en líquido de Bouin para su posterior procesamiento para microscopía de luz (HyE, tricrómico de Gomori e inmunohistoquímica). Para análisis específicos, los cortes histológicos se inmunomarcaron para la detección de insulina, glucagón, somatostatina, PP y antígeno nuclear de proliferación celular (PCNA), mediante el empleo de anticuerpos primarios comerciales y anticuerpos secundarios conjugados con peroxidasa o fosfatasa alcalina. Para los estudios morfométricos se utilizó un sistema de videomicroscopía digital (software Optimas®) para el cálculo de la densidad de volumen (DV) de las diferentes poblaciones endocrinas. Los niveles plasmáticos de glucosa, triglicéridos y colesterol se analizaron mediante kits comerciales, mientras que la insulina se midió por radioinmunoensayo (RIA).

El objetivo de nuestro trabajo fue comparar la evolución del páncreas endocrino durante la vida de dos cepas murinas, una normal (Sprague Dawley) y una diabética espontánea (eSMT) a través del estudio de diferentes variables morfológicas y plasmáticas, con el propósito de analizar las alteraciones observadas en dichas líneas y aportar nueva información referente al desarrollo de la patología diabética tipo 2. En el presente estudio se utilizaron ratas macho de 4, 24 y 30 meses de edad de una cepa normal (Sprague Dawley); y de 2, 5, 10, 14 y 18 meses de una línea diabética espontánea (eSMT). Los individuos fueron mantenidos a 22 ± 2ºC, bajo un ciclo de 12/12 horas luz / oscuridad con una dieta estándar y agua ad libitum. Los páncreas extraídos fueron fijados en líquido de Bouin para su posterior procesamiento para microscopía de luz (HyE, tricrómico de Gomori e inmunohistoquímica). Para análisis específicos, los cortes histológicos se inmunomarcaron para la detección de insulina, glucagón, somatostatina, PP y antígeno nuclear de proliferación celular (PCNA), mediante el empleo de anticuerpos primarios comerciales y anticuerpos secundarios conjugados con peroxidasa o fosfatasa alcalina. Para los estudios morfométricos se utilizó un sistema de videomicroscopía digital (software Optimas®) para el cálculo de la densidad de volumen (DV) de las diferentes poblaciones endocrinas. Los niveles plasmáticos de glucosa, triglicéridos y colesterol se analizaron mediante kits comerciales, mientras que la insulina se midió por radioinmunoensayo (RIA).